MicroCal PEAQ-ITC

Visão geral

O MicroCal PEAQ-ITC foi projetado para proporcionar facilidade de uso e sensibilidade excepcional. O sistema mede diretamente o calor liberado ou absorvido durante os eventos de ligação bioquímica, a partir dos quais ele mede a afinidade de ligação (K_D), a estequiometria (n), a entalpia (ΔH) e a entropia (ΔS). Com otimização do sistema e preparação de amostras mínimas, são gerados dados de maneira rápida e fácil. Sua ampla gama de afinidade permite a análise de ligantes de baixa a alta afinidade, com excelente capacidade de reprodução. O MicroCal ITC é uma ferramenta essencial para qualquer laboratório de pesquisa de interações biomoleculares onde a alta sensibilidade e a rapidez de resultados sejam primordiais.

• Os fluxos de trabalho guiados e fáceis de usar, com vídeos de ajuda integrados, possibilitam a geração de dados de alta qualidade, não importa o nível do usuário.
• A alta sinalização ao barulho proporciona confiança no acesso à qualidade dos dados, além de relevância da afinidade gerada e dos parâmetros termodinâmicos.
• A lavagem automatizada da célula de amostra, com detergente, e a seringa de titulação auxiliam na produção de dados reproduzíveis de alta qualidade.
• Todos os parâmetros de ligação (afinidade, estequiometria, entalpia e entropia) em um único experimento.
• Rápido até os primeiros resultados, sem desenvolvimento de análise, sem identificação, nenhuma imobilização e nenhum limite de peso molecular.
• Sensibilidade para investigar qualquer interação biomolecular usando apenas 10 µg de proteína.
• Mede diretamente as afinidades de milimolares a nanomolares (de K_DS) (10^-2 a 10^-9 M).
• Mede as constantes de dissociação nanomolares a picomolares usando técnicas de ligação competitivas (de 10^-9 a 10^-12M).
• Hastelloy não reativo para resistência química e compatibilidade com amostras biológicas.
• Compatível com solventes não aquosos.
• Atualizável para o MicroCal PEAQ-ITC Automated totalmente automatizado.

Uma ampla gama de aplicações pode ser investigada com o MicroCal PEAQ-ITC, incluindo a caracterização de interações moleculares de pequenas moléculas, proteínas, anticorpos, ácidos nucleicos, lipídeos e outras biomoléculas. Também pode ser usado para medir a cinética de enzimas. 

O software MicroCal PEAQ-ITC Analysis oferece simulação de design de experimentos, avaliação em lote de grandes conjuntos de dados, avaliação automatizada da qualidade dos dados, além de interface de usuário simplificada para guiar o usuário até os valores finais e os gráficos de qualidade de apresentação, com rapidez e facilidade.

• Abra vários experimentos em uma única sessão.
• Compatível com muitos modelos de encaixe automatizado.
  • Dissociação.
  • Cinética enzimática - várias injeções.
  • Cinética enzimática - injeção única.
  • Um conjunto de locais de ligação.
  • Locais de ligação sequenciais.
  • Um conjunto de locais - SIM.
  • Dois conjuntos de locais de ligação.
  • Competitivo.
• Avaliação automatizada da qualidade dos dados.
  • Boa qualidade de dados - com ligação.
  • Boa qualidade de dados - sem ligação.
  • Baixa qualidade dos dados - verificar dados.

Como funciona

Os microcalorímetros de titulação isotérmica medem a mudança de calor que ocorre quando duas moléculas interagem. O calor é liberado ou absorvido como resultado da redistribuição e formação de ligações não covalentes quando as moléculas que estão interagindo vão do estado livre para o estado ligado. A ITC monitora essas mudanças de calor medindo a potência diferencial, aplicada aos aquecedores de célula, exigidos para manter a diferença de temperatura em zero entre as células de referência e as de amostra uma vez que os parceiros de ligação estão misturados. A célula de referência normalmente contém água, enquanto a célula de amostra contém um dos parceiros de ligação (a amostra, que, frequentemente, embora nem sempre, é uma macromolécula) e uma seringa de agitação que contém o outro parceiro de ligação (o ligando). O ligando é injetado na célula de amostra, tipicamente em porções de 0,5 a 2 μL, até que a concentração do ligando seja de duas a três vezes maior do que a amostra. Cada injeção de ligante resulta em um pulso de calor que é integrado com relação ao tempo e normalizado para concentração para gerar uma curva de titulação de kcal/mol vs proporção molar (ligante/amostra). A curva isotérmica resultante é ajustada a um modelo de ligação para gerar a afinidade (K_D), a estequiometria (n) e a entalpia de interação (ΔH).

Especificação

Tipo de medição	Afinidade (KD)
Tipo de medição	Entalpia ∆H
Tipo de medição	Entropia ∆S
Tipo de medição	Estequiometria (n)
Volume da amostra	280 µL
Volume da célula	200 µL
Volume da seringa de injeção	40 µL
Precisão de volume de injeção	< 1% @ 2 µL
processamento de amostra	0-12 a cada 8h/dia
Material da célula	Hastelloy
Célula	Em formato de moeda
Ruído	0,15 ncal/s
Faixa de temperatura	2°C a 80°C
Estabilidade da temperatura	± 0,00012°C
Tempo de resposta	8 s*
Modos de feedback múltiplos	Sim (passivo, ganho alto, ganho baixo)
Observações	*O tempo de resposta do instrumento MicroCal PEAQ-ITC é uma constante de tempo real.  É o intervalo de tempo entre o primeiro desvio da linha de base e o ponto no pico que seja 63% da altura máxima do pico.

Ambiente operacional

Temperatura (em operação)	10°C a 28°C
Umidade	0% a 70% RH, sem condensação

Intervalos elétricos

Potência	100 - 200 V, 50/60 Hz, 130 W
Peso	13,6 kg
Dimensões (L, P, A)	43 x 38 x 46 cm (calorímetro + estação de lavagem)