Die Flüssigchromatographie ist eine Technik, mit der eine Probe in ihre Einzelteile getrennt wird. Diese Trennung erfolgt auf der Grundlage chemischer oder physikalischer Wechselwirkungen der Probe mit der mobilen und der stationären Phase. Da es viele Kombinationen aus stationären und mobilen Phasen gibt, die bei der Trennung einer Mischung eingesetzt werden können, existieren verschiedene Arten der Chromatographie, die anhand der physikalischen Zustände dieser Phasen klassifiziert werden. Die Flüssig-Fest-Säulenchromatographie, das verbreitetste Chromatographieverfahren, verfügt über eine flüssige mobile Phase, die langsam durch die feste stationäre Phase gefiltert wird und die getrennten Komponenten mit sich führt.

Sie beruht darauf, dass Pumpen ein unter Druck stehendes flüssiges Lösungsmittel mit der Probenmischung durch eine Säule mit einem festen Absorptionsmaterial befördern. Jede Komponente in der Probe interagiert geringfügig anders mit dem Absorptionsmaterial, was zu unterschiedlichen Transportgeschwindigkeiten der verschiedenen Komponenten und damit zur Trennung der Komponenten führt, die die Säule verlassen.

Es gibt viele verschiedene Arten von Chromatographieverfahren und -systemen, die für eine breite Palette von Anwendungen eingesetzt werden können. Malvern Panalytical bietet eine Reihe von Systemen und fortgeschrittenen Detektoren für die Größenausschluss-Chromatographie (SEC) an. Die Größenausschluss-Chromatographie (SEC), auch als Gelpermeationschromatographie (GPC) oder Gelfiltrationschromatographie bezeichnet, dient zur Messung von absolutem Molekulargewicht, Molekülgröße, intrinsischer Viskosität, Verzweigung und weiteren physikalischen Parametern.

Bei diesem Verfahren werden Partikel auf Grundlage der Molekülgröße (nach Stokesradius des Partikels) getrennt. Die SEC wird hauptsächlich zur Analyse großer Moleküle wie Proteine, Polymere und Polysaccharide eingesetzt. Dabei arbeitet die SEC nicht mit chemischer Interaktion oder Affinität, sondern mit physikalischer Interaktion mit den porösen Medien der Chromatographiesäulen. Dies ist ein bemerkenswerter Unterschied zwischen SEC/GPC und vielen anderen Verfahren der Flüssigchromatographie.  Die chemische Interaktion der Probe mit der Säule ist nicht erforderlich oder erwünscht.

In SEC-Säulen können kleinere Moleküle in der Probe in die Poren der porösen Medien eindringen und dort länger verbleiben oder in mehr Poren häufiger eindringen. Gleichzeitig können größere Moleküle in der Probe aufgrund ihrer Größe in viele Poren nicht oder weniger häufig eindringen und fließen deshalb an vielen Poren einfach vorbei. Größere Moleküle durchfließen die Säule daher schneller als kleinere Moleküle. Je kleiner also das Molekül, desto länger die Retentionszeit.   Für SEC/GPC gilt: „Die großen kommen zuerst heraus.“

OMNISEC

OMNISEC

Das weltweit modernste GPC/SEC-Multidetektorsystem

Mehr Details
Messung Molekülstruktur, Molekülgröße, Molekular gewicht
Molekulargewichtsbereich 200Da - 10MDa
Minimale Probenmasse (Polystyrol) 100ng
Minimale Probenmasse (BSA) 100ng
Technologie Gelpermeationschromatographie, Size Exclusion Chromatography (SEC), Statische Lichtstreuung

OMNISEC

OMNISEC

Das weltweit modernste GPC/SEC-Multidetektorsystem

Mehr Details
Messung Molekülstruktur, Molekülgröße, Molekular gewicht
Molekulargewichtsbereich 200Da - 10MDa
Minimale Probenmasse (Polystyrol) 100ng
Minimale Probenmasse (BSA) 100ng
Technologie Gelpermeationschromatographie, Size Exclusion Chromatography (SEC), Statische Lichtstreuung

OMNISEC

OMNISEC

Das weltweit modernste GPC/SEC-Multidetektorsystem

Mehr Details
Typ der Messung
Molekülstruktur
Molekülgröße
Molekular gewicht
Technologie
Gelpermeationschromatographie
Size Exclusion Chromatography (SEC)