免疫腫瘍学および腫瘍学

CLS-logo.png がんは、各種の治療アプローチの対象となる、さまざまな特性または「特徴」を持つ複雑な多面的疾患です。 

当社の経験豊富な科学者と一連のサービスは、細胞または遺伝子治療アプローチ、生物製剤または低分子製剤のいずれにおいても、がん研究プログラムの発展をサポートします。当社は、免疫腫瘍学に関する専門知識を有しています。この専門知識を活用することで、腫瘍微小環境内の薬剤候補の免疫調節効果や他の免疫変調器との併用を理解し、臨床への段階を効率的に進めることができます。

遺伝子および細胞治療の免疫学

遺伝子治療と細胞治療の結果は、免疫系によってその大部分が決定します。一方、免疫反応は、ベクターの成分、その遺伝子産物、または治療用タンパク質を産生する細胞が免疫系によって認識され、除去された場合、治療起因性免疫毒性、および治療の喪失を引き起こす可能性があります。また、遺伝子ベースおよび細胞ベースの治療法は、がんや自己免疫疾患と個別に戦うために、免疫反応の誘発または抑制につながる免疫系を使用するように設計できます。    

CLSでは、免疫系に関する専門的な知識を有しており、遺伝子または細胞治療製品が免疫細胞に与える影響を評価したいと考えている遺伝子および細胞治療のお客さまをサポートできます。当社は、お客さまが希望する取り扱い方法と形質導入方法を使用して、お客さまが提供するウイルス構造および細胞製品に対応します。 

以下に、遺伝子治療および細胞治療の分野において、当社が提供するサービスを示します。 

  • さまざまな免疫細胞や腫瘍細胞を使用した形質導入効率の評価。フローサイトメトリーまたはIncuCyte Live-Cell Analysis Systemにより導入遺伝子発現を測定
  • 腫瘍細胞株における腫瘍ウイルスの溶解能の測定
  • キメラ抗原受容体(CAR)遺伝子導入免疫細胞(T細胞、制御性T細胞、マクロファージなど)の最適化と生成
  • 免疫調節遺伝子または細胞産物の行動モードに一貫した下流実験の設計と実施(細胞増殖、サイトカイン産生、活性化マーカーの発現、腫瘍細胞に対する細胞毒性、食作用など)

混合リンパ球反応(MLR)

混合リンパ球反応(MLR)アッセイを使用すると、生物製剤または小分子が、腫瘍内微小環境(TME)における重要な免疫反応であるT細胞活性化に及ぼす影響を理解できます。

次のような使用可能なさまざまなMLRプロトコルがあります。

  • PBMCを使用する「一方向」または「双方向」MLRシステム
  • 同じドナーからの単球由来の樹状細胞(Mo-DC)とCD4+ T細胞、および刺激剤として抗CD3/CD28を使用した自己移植MLRアッセイ
  • HLA不適合ドナー(未熟または成熟)からのMo-DCおよびCD4+ T細胞を使用した異種同系MLRアッセイ

当社は、お客さまの医薬品候補の作用機序(MOA)を理解するために最適なMLRをアドバイスし、それに応じてアッセイを調整することができます。

当社は、ELISAまたはフローサイトメトリーで測定された、サイトカイン発現(例: IFN-γ)、T細胞活性化(例: Cd80)、増殖(例: CFSE)、細胞周期(例: Ki-67)など、カスタムアッセイと標準アッセイの両方を提供しています。

PBMCおよびT細胞刺激アッセイ

免疫細胞が活性化、増殖、および制御される仕組みを理解することは、新しい効果的な免疫療法抗がん剤を開発するための鍵となります。

当社は、ヒト抹消単核球細胞(ヒトPBMC)とT細胞活性アッセイのセットを提供し、化合物または、生物製剤と免疫系の相互作用の理解を支援し、より迅速に臨床に向かえるようにします。

当社は、カスタマイズされたアッセイ測定値に加えて、マルチカラーフローサイトメトリーを使用したELISA (例: IFN-γ)または増殖(例: CFSE)によるサイトカインレベルなどの標準的な分析オプションも提供しています。当社の96ウェルプレートフォーマットにより、複数の化合物の中程度のスループットスクリーニングを可能にし、迅速に正確な結果を提供します。

疲弊T細胞アッセイ

当社は、マウスとヒトの両方の疲弊CD4+T細胞アッセイを開発しました。これは、T細胞の枯渇を逆転させ、正常なエフェクター機能を回復させる化合物の有効性をテストするための重要なツールです。

腫瘍内微小環境(TME)でT細胞が枯渇すると、増殖する腫瘍に効果的な免疫反応を高める能力が低下します。

当社の中程度スループットアッセイは、免疫細胞のチェックポイント標的を調節できる化合物の有効性を評価するのに最適です。お客さまの化合物は、当社の検証済み基準制御化合物に対してテストできます。増殖(例: Ki-67、CFSE)やサイトカイン分析(例: IFN-γ)など、要件に合わせていくつかの測定値を使用できます。

当社独自のマウスアッセイは、TCR遺伝子組み換えCD4+T細胞に基づいています。この細胞は、WT-MBPで刺激して、完全に反応するエフェクターT細胞を誘発するか、疲弊T細胞を生成するスーパーアゴニストとして機能する変容リガンドMBP (APL-MBP)で刺激することができます。これらの細胞は、腫瘍内微小環境におけるT細胞の枯渇状態を効果的に模倣するため、がん免疫学研究に大きく関連します。

当社の検証済みヒト疲弊T細胞アッセイは、腫瘍内微小環境の疲弊T細胞を表現型および機能的に再検出することが検証され、実証されています。詳細については、以下のビデオブログで、この作用の説明をご視聴ください。 

キリングアッセイ

試験生物製剤または小分子が腫瘍細胞の殺傷効果を高めるかどうかを理解することが、IO創薬プログラムの重要な要素となる可能性があります。

当社は、免疫系が標的細胞の消滅を促すメカニズムを評価するためのインビトロアッセイを幅広く提供しています。我々は、SartoriusのIncuCyte Live-Cell Analysis Systemを使用して、リアルタイムで定量化ライブ細胞画像処理と分析を行い、アポトーシスの動態とメカニズムを調査します。

当社のキリングアッセイは、さまざまな腫瘍細胞株、PBMC、NK細胞、マクロファージ、好中球などの免疫細胞集団、および活性化された補体反応や医薬品候補の組み合わせに適応できます。当社は、ELISA、多重またはMSDによるサイトカイン発現、マルチカラーフローサイトメトリーによる増殖および細胞表面マーカーから、qPCRまたはNGSによる遺伝子発現まで、カスタムおよび標準的な測定値を提供しています。当社の96ウェルプレートフォーマットにより、複数の化合物の中程度のスループットスクリーニングを可能にし、迅速に正確な結果を提供します。

ADCCアッセイ

当社の抗体依存性細胞媒介性細胞毒性(ADCC)アッセイは、生物製剤が標的抗原に関与しているかどうかを理解し、細胞死を開始するFC受容体を介して免疫細胞を活性化するか、またはFC消音アプローチが有効かどうかを判断するのに役立ちます。

当社は、非放射性ラベリング技術を使用して特定の標的を最適化することができます。また、このアッセイは、混合細胞集団(PBMC)から分離細胞(NKなど)まで、さまざまな免疫細胞に適応させることができます。

CDCアッセイ

補体依存性細胞毒性(CDC)アッセイを使用すると、抗体ベースの治療薬を評価して補体免疫系を活性化(標的細胞死をもたらす固有の反応)することができます。

通常、がん細胞は高レベルの補体阻害剤分子を発現し、このような自然免疫機構から保護します。当社は、生物製剤と免疫系の相互作用についてお客さまの理解をサポートし、より早く臨床に向かえるようにします。

食作用アッセイ

新規治療法が食作用を調節または誘発できるかどうかを理解することは、免疫療法薬の発見段階の鍵となる可能性があります。食作用は先天性免疫反応の主要なメカニズムの1つであり、一般的に最も関与する食細胞には好中球、マクロファージ、単球およびDCがあります。

当社は、さまざまな食作用ベースのアッセイを提供し、化合物または、生物製剤と免疫系の食細胞の相互作用の理解を支援し、より迅速に臨床に向かえるようにします。

当社の食作用アッセイは、お客さまの要件に合わせて調整可能です。これらのアッセイには、次の要素が含まれます。

  • 死細胞またはアポトーシス細胞のクリアランス(エフェロサイトーシス)
  • 抗体依存性細胞毒性(ADCP)
  • 食作用信号のブロック(例: CD47)
  • 細菌や酵母生体粒子の摂取

当社は、お客さまと緊密に連携し、免疫細胞または対象の疾患に基づいて最適なアプローチを選択します。食作用のカーゴには、細菌、ビーズ、腫瘍細胞が含まれます。当社の標準測定値はncuCyte® Live-Cell Analysis Systemを使用します。また、カスタマイズされた測定値は、ELISA、多重またはMSDによるサイトカイン発現、マルチカラーフローサイトメトリーによる増殖および細胞表面マーカー、またはqPCRまたはNGSによる遺伝子発現を含めることができます。

ADCPアッセイ

抗体依存性細胞媒介性食作用(ADCP)は、多くのモノクローナル抗体治療にとって重要なMOAです。当社のADCPアッセイでは、単球またはマクロファージを標的細胞の食作用のエフェクター細胞として使用し、FC受容体を介した特定抗原との抗体関与の有効性を理解します。

当社のインビトロのマクロファージ分化に関する高度な専門知識を、カスタムアプローチおよび測定値オプションと組み合わせることで、お客さまに適した食作用アッセイを確実に設計できます。

骨髄性細胞アッセイ

骨髄性細胞は、免疫療法がん治療の潜在性がある重要な標的免疫細胞です。腫瘍内微小環境(TME)における表現型および機能的免疫細胞の変化を促進する分子または生物製剤をスクリーニングすることは、がん免疫学の創薬プログラムにとって重要です。

当社は、さまざまな骨髄性細胞に対するお客さまの化合物の影響を調査するカスタムアッセイを提供します。対象の骨髄性細胞(単球、マクロファージ、樹状細胞(DC)、顆粒球)を、お客さまのニーズに合わせて骨髄性細胞アッセイをカスタマイズできます。当社では、お客さまの化合物が単一培養タイプに及ぼす影響を検証するために、単一細胞アッセイと混合細胞アッセイの両方を提供しています。

どのような科学的質問でも、当社の免疫学の専門知識と骨髄性細胞に関する経験が、お客さまのIO創薬プログラムをサポートします。当社の骨髄性細胞アッセイのセットには以下のものが含まれます。

  • M1およびM2マクロファージ分化アッセイ
  • M1およびM2マクロファージ偏光アッセイ
  • DCの活性と熟成
  • 混合リンパ球反応(MLR)
  • 異種同系
  • 自己移植
  • 抗原特異的T細胞反応
  • 食作用アッセイ
  • M1媒介T細胞活性化アッセイ
  • M2抑制アッセイ
  • MDSC抑制アッセイ

当社は、お客さまの医薬品候補の作用機序(MOA)を理解するために最適なアッセイの設定をアドバイスし、それに応じてアッセイを調整することができます。当社は、サイトカイン発現(ELISA、多重、MSD)、増殖、細胞活性化、細胞表面マーカー(フローサイトメトリー)など、カスタムアッセイと標準アッセイの両方を提供しています。

抑制アッセイ

当社は、分子または生物製剤の機能をスクリーニングするためのアッセイのセットを提供しています。これらのアッセイは、潜在的な免疫療法がん治療のための重要な作用機序(MOA)であるM2マクロファージ、MDSC、制御性T細胞(Treg)など、さまざまな免疫細胞集団によって媒介されるT細胞の抑制を反転する能力を備えています。

マクロファージ抑制アッセイ

腫瘍内微小環境(TME)は免疫細胞の分化と蓄積を促進し、腫瘍関連マクロファージ(TAM)やM2マクロファージなどの腫瘍増殖を促します。当社では、化合物をスクリーニングしてこれらのメカニズムをブロックする可能性に対して、さまざまなカスタマイズ可能なアッセイを用意しています。これにより、T細胞の抑制と抗腫瘍反応を低減できます。T細胞抑制の反転は、サイトカイン放出(ELISA、多重またはMSD)、遺伝子発現変化(qPCR)、またはフローサイトメトリーを使用した増殖および活性化マーカーによって測定できます。

当社では、腫瘍馴化培地(腫瘍細胞株および腹水サンプル)と分離TAMを利用して、エクスビボプロトコルを開発しています。これらは、カスタマイズ可能なインビトロアッセイシステムからの複雑性の翻訳向上としてマクロファージ抑制アッセイで使用できます。

MDSC抑制アッセイ

骨髄由来抑制細胞(MDSC)は、TMEの重要な要素です。当社のMDSC媒介T細胞抑制アッセイにより、化合物または生物製剤がMDSC機能をブロックし、T細胞活性化を緩和できるかどうかを判断することができます。

Treg抑制アッセイ

制御性T細胞(Treg)は、自己免疫疾患などの不要な免疫を阻害する可能性があります。また、これとは逆にがんに対して必要な免疫を抑制する場合もあります。当社では、Treg活性を促進または低減する医薬品候補の能力を研究するために、カスタマイズ可能なTreg抑制アッセイを用意しています。当社はお客さまと緊密に連携し、お客さまの要件に合わせて主要なアッセイの測定値を調整します。

当社のTreg抑制アッセイは、インビトロで生成された誘導性FoxP3+ Tregs (iTregs)を組み込むことができます。または、ナチュラルTreg (nTregs)を分離してこのアッセイで使用することができます。この場合、一部の腫瘍タイプによって誘導される可能性があり、免疫腫瘍研究に非つねに関連性が高いFoxp3誘導をより厳密に反映します。

IOインビボモデル

がん免疫療法では、患者の免疫系と連携して抗腫瘍反応を増加させます。同種マウスモデルでは、機能的免疫系を有する新たながん免疫療法を、他のインビボモデル(例: 異種移植モデル)と比較して研究することができます。

当社では、インビボマウスモデルを使用することは、がん免疫学の臨床前フェーズにおける重要な翻訳ステップであることを認識しています。 

当社では、いくつかの同系腫瘍モデル(B16.OVAやLewis Lungモデルなど)を提供しています。これらのモデルは、当社のカスタムインビトロアッセイの多くの測定値と組み合わせることができ、TME内での詳細なMOA調査を可能にします。

当社の免疫学と組織学の専門知識により、お客さまのインビボモデルの堅牢な分析とレポートが提供されます。単一のセクションでルーチンH&Eから最大9プレックスの多重免疫蛍光染色までの組織学的分析を実行できます。当社のフロー専門家は、必要に応じてカスタマイズされたパネルを設計でき、ELISA、多重、qPCR、NGSの測定値もサポートできます。

当社は、お客さまと緊密に連携して、お客さまの要件に基づいて既存または新しいインビボモデルを最適化、または検証し、臨床への最適な経路に進めるようにします。

腫瘍学創薬

当社の広範な専門知識と、がん治療薬の発見に対するコンサルティングアプローチにより、お客さまに合わせてカスタマイズされた堅牢なプログラムを提供できます。当社は、お客さまのチームの延長にある存在として、臨床候補用に調整された焦点を当てた研究または完全に統合されたプログラムを提供できます。当社は、腫瘍標的化と併用療法の調査を行うことで、精密医療アプローチをサポートするための特別な作業プログラムを提供しています。

当社は、医薬および計算化学、生物学、DMPKで構成されたプロジェクトチーム全体を提供し、DNA損傷修復プロセス、代謝、免疫腫瘍学、精密医療戦略など、さまざまな機械的アプローチをサポートしています。 

Conceptでは、各クライアントプロジェクトに合わせてチームとアプローチを調整し、小分子ヒットの同定、カスタムスクリーニングカスケード設計と実行、医薬品化学の最適化から、API GMP製造、生物分析、臨床での患者バイオマーカー評価まで、プログラムをサポートします。また、ADCPROTAC、非小分子創薬アプローチなどの代替モダリティにも取り組んでいます。

当社の腫瘍学サービスには、次のものがあります。

  • カスタムアッセイおよびスクリーニングカスケードの開発
  • 高コンテンツ表現型プロファイリング
  • 新規MOAを含む生物物理学の専門知識
  • TME研究および翻訳アッセイ: 化合物のインビトロ、インビボ、およびエクスビボスクリーニングによる表現型および機能的免疫細胞の変化の促進
  • 健康な組織および罹患した組織での標的遺伝子およびタンパク質発現
  • バイオマーカー/患者選択方針
  • PROTAC、ADC、および小分子創薬
  • 医薬品化学、合成化学、計算化学
  • ADMETスクリーニング、生物分析、PK評価
  • プロセス研究開発、API GMP製造、分析サポートサービス

NanoString

最大800個のRNA、DNA、またはタンパク質標的の多重解析に対応するシンプルで高感度の正確なソリューションNanoStringのnCounter®技術は、DNAマイクロアレイの変異型であり、色分けされた分子バーコードを使用して各サンプル内の転写産物の数を提供します。

当社は、お客さまと緊密に協力して合理的かつ段階的な創薬プログラムを提供します。このプログラムは、シグナル経路、下流遺伝子の調節、および医薬品候補の標的細胞タイプに関する洞察を提供します。当社のNanoStringおよびNGSサービスは、臨床への最適な経路をお客さまに伝えることができます。

NanoStringの主な利点は次のとおりです。

  • 最大800個のRNA(mRNA、microRNAs、SNV、CNV)、DNAまたはタンパク質標的のプロファイル
  • 腫瘍学、免疫学、神経科学用の既製のカスタムパネル
  • 少量の貴重なサンプル材料で対応可能
  • FFPE、組織、粗細胞ライセート、生体液などの扱いにくいサンプルタイプに最適
  • ヒトおよびマウス
  • qPCR(増幅ステップなし)よりも正確かつ迅速で、NGSよりもシンプル

NanoStringは、当社のカスタムインビトロインビボ、およびエクスビボアッセイシステムの測定値として使用できます。また、RNA抽出用、または抽出前RNAとしてサンプルをお送りください。当社がお客さまのニーズに合わせてカスタマイズいたします。