CLS-logo.png Concept Life Sciencesには免疫学の専門家チームがあり、ターゲットと化合物のMOA(作用機序)と免疫調節効果を理解し、創薬パイプラインを発展させる支援をします。

当社は共同実験設計を提供し、最適な細胞タイプ、単一または共培養アッセイに関するアドバイスを行います。お客さまの要件に合わせてアッセイをカスタマイズおよび開発することで、最適なデータパッケージを構築できます。

当社は、信頼できるデータを提供し、結果を専門家が解釈することで、リード化合物の選択に信頼性を与え、臨床へのルートを加速させます。

末梢血単核細胞(PBMC)

開発段階(化合物選択のスクリーニングや詳細な作用機序(MOA)/検証研究など)に最適なアッセイを提供するために、お客さまの標的経路を時間をかけて理解します。

PBMCアッセイは、単純な免疫刺激を使用した大規模な分析に最適です。自然単核細胞活性のTLR刺激やT細胞機能のT細胞受容体ライゲーションなどの研究ニーズに合わせてPBMC研究をカスタマイズし、設計することができ、創薬パイプラインを促進させます。

PBMCは、自己免疫からがんまで、および複数のアッセイで、免疫学のあらゆる領域で使用できます。このデータは、化合物のMOAをさらに調査するために設計された、より高度な免疫測定法(単一培養または共培養)に進むための情報を提供します。

T細胞

医薬品候補にT細胞がどのように反応するかを理解することは、治療法を市場に出すための鍵となります。

当社では、さまざまなT細胞アッセイを提供して、T細胞と医薬品候補の相互作用の微妙な差異の調査をサポートします。抗炎症療法または抗がん治療のいずれを開発している場合でも、当社の包括的なT細胞アッセイパネルを使用することで、有用な有効性データが得られます。

T細胞アッセイは個々のT細胞集団に焦点を合わせることができるため、研究に関するより具体的な質問をして、より複雑な混合細胞集団から取得したデータを補完できます(例: PBMC)。当社のT細胞偏光アッセイは、T細胞の分化と機能に対する化合物の影響、および自己免疫疾患やアレルギー疾患などのさまざまな炎症性疾患の発生を研究することができる優れたツールです。当社では、研究要件に合わせて標準およびカスタムの測定値を使用できるヒトTh1、TH2、Th17、および制御性T細胞アッセイのセットを提供しています。

お客さまの研究ニーズに応じてパッケージをカスタマイズできます。単独で、または他の細胞と組み合わせることで、以下のアッセイを提供します。

  • T細胞偏光アッセイ
  • T細胞刺激アッセイ
  • T細胞キリングアッセイ
  • Treg抑制アッセイ
  • 抗原特異的T細胞アッセイ
  • 混合リンパ球反応(MLR)

ナチュラルキラー(NK)細胞

当社は、NK細胞に対する医薬品候補の影響と幅広い免疫反応の研究のために、調整されたアッセイを提供しています。

NK細胞は腫瘍細胞を殺す能力があるため、がん免疫療法、特に抗体媒介細胞毒性(ADCC)を介して作用する治療的モノクローナル抗体にとって魅力的な研究対象となります。

腫瘍細胞/細胞株の対象抗原発現を調査している場合でも、制御性T細胞、M2マクロファージ、骨髄由来抑制細胞(MDSC)などの免疫抑制細胞によってADCC反応を促進する場合でも、NK細胞の細胞毒性機能を評価する場合でも、お客さまの研究ニーズを満たすNK細胞の周辺にカスタムプログラムを設計することができます。当社の科学チームが、研究に関する質問に答え、分子のMOA、有効性、リード最適化をサポートします。

また、ELISAまたは多重によるサイトカイン発現、FACSを使用した増殖および細胞表面マーカー、IncuCyte Live-Cell Analysis Systemを使用した生細胞画像分析などの、カスタムおよび標準アッセイの測定値も提供しています。

樹状細胞(DC)

当社は、樹状細胞(DC)の役割と、免疫反応における医薬品候補または標的の理解をサポートします。

当社は、単一培養内のDCをスクリーニングすることも、混合リンパ球反応(異種同系/自己移植、未熟/成熟)内のT細胞と組み合わせてスクリーニングすることもできます。また、標準的なフローサイトメトリー(例: MHC、CD80、CD86、PD-L1)に加えて、カスタムアッセイの測定値や、サイトカイン放出アッセイ(例: DCからのIL-10とIL-12、またはT細胞からのIL-10とIFN-γ)を提供できます。

がんや自己免疫疾患のどちらを研究している場合でも、お客さま固有の研究ニーズを満たすDCに関する研究をカスタマイズできます。当社の専門スタッフが、抗原提示細胞としてのDC成熟、偏光、相互作用、および有効性に関する研究質問に回答いたします。

骨髄性細胞

骨髄性細胞は、体内で最も豊富な有核造血細胞で、さまざまな種類の細胞で構成され、多様な機能を有しています。単球、マクロファージ、DCおよび顆粒球を含み、免疫系の重要な治療群を構成します。

当社の免疫学専門家は、化合物または生物製剤が骨髄性細胞の表現型または機能に影響を与えるかどうか、分離細胞タイプ設定で影響を与えるか、または共培養環境で影響を及ぼすかどうかを理解し、免疫学発見プログラムに最適な複雑度を確保できるように支援します。

当社の単球およびマクロファージ単一培養は、高価な動物実験が不要なため、臨床前の最適化(線量反応の決定など)に理想的な方法です。M1マクロファージアッセイは、関節リウマチなどの自己免疫疾患での炎症誘発性反応を阻害する化合物の研究用に設計されています。M2マクロファージアッセイは、腫瘍内微小環境による免疫系の抑制をなくすよう設計された医薬品候補に最適です。

樹状細胞、特に炎症性DCは循環単球から発生します。当社は、お客さまの医薬品候補がこの分化プロセスに影響を与えるかどうか判断することができます。また、DCの成熟に及ぼす複合作用の調査もサポートします。

インビボ研究や臨床試験を開始するお客さまには、薬剤の有効性を確認するための機能アッセイを提供しています。 

肝細胞

薬物性肝傷害(DILI)は、臨床における治験薬(IND)失敗の主な原因の1つです。Concept Life Sciencesでは、創薬の初期段階でお客さまの試験化合物や生物製剤が肝細胞に及ぼす影響を把握することの重要性を理解しています。

肝細胞は、毒素や薬物代謝、およびクリアランスにおいて重要な役割を果たします。当社は、インビトロアッセイで初代肝細胞(ヒト、ラット、マウス)を使用して、薬物肝毒性を予測します。当社の初代細胞アッセイシステムは、医薬品候補の肝細胞増殖、代謝、酵素活性に及ぼす影響を評価します。

角化細胞

角化細胞は重要ですが、調査が困難な初代細胞型です。当社は、新たな治療薬候補が角化細胞の機能に与える影響と、その免疫細胞との相互作用を理解して創薬プログラムを推進させることの重要性を理解しています。

当社のカスタマイズ可能なインビトロ皮膚アッセイは、角化細胞増殖、移行、分化、サイトカイン産生を評価できます。当社は、健常患者および疾患患者(乾癬やアトピー性皮膚炎など)、およびさまざまな細胞株からヒト初代角化細胞を調達し、翻訳モデルを提供できます。

皮膚は人体の中で最大の組織であり、多くの疾患において重要な治療標的です。

細胞毒性

承認薬が市場で流通できなくなる主な原因に薬物誘発毒性があります。発見の初期段階で潜在的組織または細胞関連毒性を特定することで、時間とコストを節約し、最終的には臨床へ早く進めるようになります。

当社では、細胞毒性を調査する理由を理解しています。開発を進めるために化合物ライブラリをスクリーニングして選択的細胞毒性のIO医薬品候補を見つける必要があるか、不要な細胞毒性効果の「ヒット」をスクリーニングする必要があるかどうかにかかわらず、当社の免疫学の専門家はお客さまと緊密に連携し、お客さまの化合物が腫瘍細胞を含む免疫細胞と非免疫細胞の両方の生存能力に影響を与えるかどうかを判断します。

初代細胞のノウハウとカスタムインビトロアッセイアプローチを使用することで、当社は、標準およびカスタム測定値(例: IncuCyte Live-Cell Analysis System、フローサイトメトリー、ELISA、qPCR)の両方を使用して、PBMC、T細胞、B細胞、NK細胞、単球、および単一または共培養のDCなどの混合または分離細胞集団のアポトーシスとネクローシスを評価します。

また、標的細胞死のメカニズムを調査するためのキリングアッセイも提供しています。

移行アッセイ

細胞移行は、生細胞の主要なメカニズムであり、免疫反応やその他の疾患過程に不可欠です。細胞移行を評価するアッセイは、がん転移と炎症、および創傷治癒を理解する上で重要です。

当社では、新規医薬品候補に反応する生細胞の挙動を研究するための、掻創アッセイやトランスウェル移行アッセイなどのインビトロ細胞移行アッセイのセットを用意しています。

掻創移行アッセイ

お客さまの要件に合わせて選択されたさまざまな細胞株を使用して、インビトロでの方向性細胞の移行を研究するためのシンプルな創傷治癒アッセイです。集密的な細胞単分子層で「創傷」が発生し、詳細な細胞移行挙動が、タイムラプス顕微鏡画像処理を使用して評価されます。さらにカスタマイズ可能な測定値には、FACSおよびELISAによる機能細胞の変化が含まれます。

トランスウェル移行アッセイ

トランスウェル移行アッセイを使用して、免疫細胞の移行に及ぼす化合物の影響を調べます。

細胞はトランスウェルの上部コンパートメントに播種され、下部コンパートメントの走化性試薬で刺激されます。細胞の移行は時間の経過に応じて監視され、移行した細胞はFACSとカウントビーズを使用して下部コンパートメントから収集および列挙されます。このアッセイは、特定の免疫細胞と化学誘引物質を使用してカスタマイズできます。

免疫安全アッセイ

Concept Life Sciencesは、大規模なドナーコホートでスクリーニングを行う前に、最適なサイトカイン放出アッセイ(CRA)フォーマットを決定するための、試験物質に対する科学主導の最適化アプローチを提供します。 

新しい分子種は注入反応を誘発し、その結果、広範な炎症反応と有害反応を特徴とするサイトカイン放出症候群(CRS)にいたる可能性があります。

6人のボランティアが多臓器不全に陥ったTeGenero TGN1412 FIH試験を踏まえ1、FDAは製剤および生物製剤の免疫毒性の非臨床安全性評価に関する指針の草案を発表しました(2020年2月)。

ヒト細胞ベースのインビトロアッセイをテストして、有害なサイトカインの放出を検出するためのプロトコルが複数ある場合、各プロトコルを試験物質ごとに最適化する必要があります2

当社のCRAアッセイの詳細(図1: サイトカイン放出アッセイの実施方法)については、当社のアッセイのカタログをダウンロードしてください。

参考資料:

  1. BMJ 2006;332:677 - Learning from the TGN1412 trial 
  2. Findlay, Eastwood, Ball et al.2011; Comparison of novel methods for predicting the risk of pro-inflammatory clinical infusion reactions during monoclonal antibody therapy.Journal of Immunological Methods, 371, 134-142

サイトカイン放出アッセイの実施方法(図1)

1.遺伝的多様性を確保するために、複数のドナーから採取した末梢血サンプルが使用されています。2.試験および制御化合物は、必要な濃度に調製され、ウェットコートをアッセイプレートに塗布するか、水相で使用します。その後、希釈した血液が添加され、プレートを1時間、6時間、または24時間培養します。

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3.試験物質は、活性化免疫細胞からサイトカインを放出するために、特定の細胞標的と相互作用します。4.アッセイプレートが沈降され、MSDを使用してGMCSF、IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、およびTNFαなどのサイトカインのパネルを測定するために、上清が使用されます。

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5.データは分析され、ヒートマップ、棒グラフ、ドットプロットなどの分かりやすい形式で表示され、さまざまなドナー間のサイトカイン反応の概要を示したり、個々の治療およびサイトカインに対する反応者と非反応者の集団を特定したりします。 CRA flow image 5.png

炎症性インビボモデル

当社では、インビボモデルを使用して化合物のMOAを調査することが、臨床にいたる要件であることを理解しています。当社は、炎症性環境における医薬品候補の効果を研究するために活用できる、さまざまなインビボおよびエクスビボプラットフォームをご用意しています。

当社は、お客さまと緊密に連携し、免疫細胞または対象の疾患に基づいて最適なアプローチを選択し、お客さまの化合物または生物製剤をしっかりと把握できるようにします。

当社のカスタマイズ可能なモデルでは、次のことを学習できます(これらに限定されません)。

  • 抗原投与
  • CNS (EAE)の自己免疫炎症
  • 遅延型過敏症(DTH)
  • マクロファージ生物学
  • 肝疾患

当社では、標準的なカスタマイズされた測定値を提供して、医薬品候補のMOA調査を確実に行います。当社の組織学専門家は、組織学的分析から専門家的な多重免疫蛍光染色に適した標準的なH&Eを提供します。また、当社の免疫学の専門知識により、カスタマイズされたFACS分析、ELISA、qPCR、NGSの測定値を使用できます。