액상 크로마토그래피는 시료를 개별적인 부분으로 분리하는 데 사용되는 기법입니다. 이러한 분리는 시료과 이동상/고정상의 화학적 또는 물리적 상호작용을 이용한 것입니다.
액체 크로마토그래피는 어떻게 작동하나요?
혼합물 분리 시 사용할 수 있는 고정상/이동상 조합은 많기 때문에 여러 가지 다양한 종류의 크로마토그래피가 존재하며, 그 분류는 상들의 물리적 상태에 기반을 둡니다. 액체-고체 칼럼 크로마토그래피는 가장 많이 사용되는 크로마토그래피 기법으로 액체 이동상이 고체 고정상을 통해 흘러내리면서 천천히 여과되어 성분이 분리되는 것이 특징입니다.
이 크로마토그래피는 시료 혼합물을 포함한 가압 액체 용매를 펌핑하여 고체 흡착제가 채워진 컬럼에 통과시키는 것이 관건입니다. 시료의 각 구성요소는 약간씩 다르게 흡착제와 상호작용하기 때문에 서로 다른 성분의 이송 속도가 다르게 나타나며, 시료가 칼럼에서 흘러내리면서 성분이 분리됩니다.
고성능 액체 크로마토 그래피
다양한 응용 분야에 사용할 수 있는 다양한 유형의 크로마토그래피 기법과 시스템이 있으며, 모두 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)로 정의됩니다.
HPLC 분석은 화학적 상호작용, 친화도 또는 유체역학적 부피를 통한 거대분자 분리에 초점을 맞춥니다. SEC-HPLC는 크로마토그래피 칼럼 다공질체와의 물리적 상호작용으로 작동합니다. 이는 SEC와 기타 많은 액체 크로마토그래피 기법과 큰 차이가 있습니다. 분리는 분자 크기(입자의 스톡스 반경)에만 기반하므로 시료와 칼럼의 화학적 상호작용은 필요하지 않으며 요구되지도 않습니다. SEC는 단백질, 고분자 및 다당류와 같은 대분자의 분석에 주로 사용됩니다.
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GPC/SEC 컬럼
GPC 및 SEC 컬럼
SEC 칼럼에서 시료의 작은 분자는 다공질체의 공극에 들어가 오래 머무르거나, 더 많은 공극에 더 자주 들어갈 수 있습니다. 반면 시료의 큰 분자는 들어갈 수 있는 공극의 크기가 더 제한적이어서 덜 자주 들어가거나, 공극에 들어가기에 너무 큰 경우 공극을 그냥 지나쳐 버립니다.
따라서 큰 분자는 작은 분자보다 더 빨리 컬럼을 통과하게 됩니다. 즉, 분자가 작을수록 머무르는 시간이 길어집니다. SEC/GPC에서는 큰 분자가 먼저 배출된다는 점을 기억하십시오.
GPC/SEC 검출기 솔루션
Malvern Panalytical은 절대 분자량, 분자 크기, 고유 점도, 분기 및 기타 물리적 매개변수 측정을 위한 겔 투과 크로마토그래피(GPC) 또는 겔 여과 크로마토그래피라고도 하는 크기 배제 크로마토그래피(SEC)를 위한 다양한 시스템과 고급 검출기를 제공합니다.
