液相層析法是一種用來將樣本分離為其個別成分的技術。這種分離是基於樣本與動相和靜相的化學或物理交互作用而發生。
液相層析法如何運作？
在分離混合物時，有多種靜相/動相組合可使用，因此層析法可根據這些相的物理狀態劃分為幾種的不同類型。液相-固相管柱層析法是最廣泛使用的層析技術，做法是讓液體動相緩慢向下濾過固體靜相，使靜相挾帶分離出的成分。
此分析法係利用幫浦將含有樣本混合物的加壓液體溶劑泵送通過填充有固體吸附劑材料的管柱。樣本中的各種成分與吸附劑材料的交互作用方式彼此略有不同，因此不同成分的傳輸速率也各不相同，導致成分從管柱流出時產生分離。
高效液相層析
有多種層析技術與系統可供選用，適用於各式不同的應用，而這些技術與系統都統括定義為高效液相層析法 (HPLC)。
HPLC 分析著重在透過化學交互作用、親和力或流體力學體積來進行巨分子單離。SEC-HPLC 係透過與層析管柱多孔性介質的物理交互作用來運作，而這是 SEC 與許多其他液相層析技術不同的地方。樣本與管柱的化學交互作用並非必要，理想狀況下也不應產生，因為分離應僅由分子大小 (依照粒子的斯托克半徑) 促成。SEC 主要用於分析大分子，例如蛋白質、聚合物和多醣。
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GPC/SEC 色譜管柱
GPC 和 SEC 管柱
在 SEC 管柱中，樣本中的較小分子將能夠進入多孔性介質的孔隙，並且在該處停留更久，或更頻繁地進入更多孔隙。另一方面，樣本中的較大分子所能進入之孔隙的大小受限，較不常進入，或者如果分子太大，便只會繞過孔隙而不進入。
因此較大的分子流過管柱的速度將會比較小的分子還要快，換句話說，分子越小，停留時間越長。在 SEC/GPC 中，請記得「大分子會先出來」。
