Guia para peso molecular – com o Zetasizer

Medições de peso molecular com o software Zetasizer?

Primeiro, algumas palavras de cautela: medições de peso molecular ou Mw, em geral, não são fáceis, requerem tempo, boas habilidades de preparação de amostra, bem como paciência. Se você é novo no Zetasizer da Malvern, pode ser melhor familiarizar-se primeiro com a técnica rápida, amigável e bastante tolerante de espalhamento de luz dinâmico (DLS). {{Se você tem experiência e deseja examinar em profundidade o Zetasizer, avance para Uma Evolução na Tecnologia de Espalhamento de Luz}}.

OK, esclarecido isso, o software consegue lidar com o espalhamento de luz estático com o método relativamente simples de série de concentração. Tudo o que é necessário é:

• um padrão de espalhamento (que geralmente é o padrão Tolueno)
• o dispersante, ou solvente (onde o material de amostra é disperso)
• uma série de concentrações no dispersante (5 ou mais diferentes seriam um bom número)

Recomendamos cuvetes de vidro ou quartzo de qualidade, para evitar quaisquer desvios devido a arranhões, variações de espessura das paredes, imperfeições de fabricação que poderiam alterar a intensidade de espalhamento absoluto.

O calculador de concentração no software (download gratuito) pode fornecer orientações sobre uma faixa de concentração apropriada para medições de peso molecular. Isso pode ser acessado através de Ferramentas – Calculadoras – Utilitários de Concentração. Por exemplo, com uma amostra de peso molecular esperado de 75.000, uma faixa de concentrações entre 0,2 a 2,0 g/L seria adequada. (Isto é apenas uma recomendação de orientação estimada, um pouco fora dessa faixa também deveria funcionar).

Para a configuração de um POP (procedimento operacional padrão ou método de medição), a maioria das configurações do ‘Tipo de Medição Peso Molecular’ são autoexplicativas. É altamente recomendável também realizar medições de tamanho e verificar a configuração para salvar resultados parciais (ou seja, funções de correlação inadequadas) de qualquer maneira.

Com medições de tamanho realizadas durante o método de medição de peso molecular, será muito mais fácil ajudar a solucionar quaisquer resultados inesperados.

Por que o peso molecular está totalmente errado?

Várias razões potenciais podem se combinar para levar a um resultado inesperado.

1. Preparação da amostra. A intensidade espalhada é a soma de todas as contribuições na amostra, o que leva a um peso molecular médio. E agregados, poeira, detritos, todos contribuem para essa média. Frequentemente, filtração, centrifugação ou cromatografia podem ser úteis para “limpar” a amostra. Realize medições de tamanho DLS para confirmar.
2. Dispersante não limpo. Semelhante ao primeiro ponto, especificamente se a medição do dispersante ou solvente estiver errada, isso influenciará o resultado geral.
3. Padrão de espalhamento inadequado. O tolueno pode degradar, pode precisar de filtração, evitar contato com água, pois pode levar a micelas; a cuvete pode não estar limpa. Uma taxa de contagem alvo para tolueno deve ser de 150-350 kcps em um Zetasizer Nano ZS (400-700 kcps em um ZSP). Realize a medição DLS para confirmar a ausência de partículas.
4. Valor de dn/dc incorreto. É parte da equação e entra com seu quadrado; 20% de erro em dn/dc significa 40% de erro no peso molecular.
5. Valores de concentração da amostra incorretos. O material da amostra não está completamente dissolvido, material perdido na filtração.

Se nenhum desses itens for uma preocupação, envie-nos os dados.

Para medições de peso molecular rotineiras, use GPC!

O espalhamento de luz estático pode ser trabalhoso. Se essa informação for necessária regularmente, pode ser melhor considerar o espalhamento de luz em conjunto com uma técnica de separação (frequentemente conhecida pelo acrônimo SEC-MALS) como cromatografia (por exemplo, um OMNISEC), onde a amostra é sempre automaticamente “limpa” devido ao mecanismo de separação.

Espero que o acima possa facilitar algumas medições de peso molecular melhoradas no Zetasizer para você.

Um vídeo narrado sobre o Zetasizer e funcionalidade pode ser encontrado aqui: Uma Evolução na Tecnologia de Espalhamento de Luz.

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