Como detectar fluorescência em nanopartículas

Como Gerente de Produto do NanoSight Pro, estudei nanopartículas extensivamente e vi como a detecção de fluorescência se tornou uma virada de jogo para a análise de nano e biopartículas. Como uma extensão das técnicas tradicionais de espalhamento de luz, a fluorescência pode apoiar sua pesquisa e fornecer insights ainda mais profundos.

O NanoSight Pro aproveita essas vantagens para oferecer insights detalhados sobre o tamanho, concentração e identidade das nanopartículas – informações que são inestimáveis em campos que vão da biofísica até a nanomedicina. Continue lendo para descobrir como.

O que é fluorescência?

Essas moléculas absorvem a luz enquanto ganham energia. Mas, assim como a bola de futebol, não conseguem manter essa energia por muito tempo. Quase imediatamente, elas liberam a energia extra emitindo luz. Essa luz emitida é o que chamamos de fluorescência. A luz liberada tem um comprimento de onda mais longo e normalmente é de uma cor diferente da luz absorvida.

O poder da detecção de fluorescência

Detectar fluorescência de nano e biopartículas pode aumentar significativamente nossa capacidade de analisar suas subpopulações. Anexando fluoróforos a nanopartículas, podemos rotulá-las e rastreá-las usando análise de rastreamento de nanopartículas (NTA) – assim como um sistema GPS pode monitorar a posição de objetos.

Técnicas existentes como a Dinâmica de Luz Dispersa usam lasers para iluminar nanopartículas e pequenos biológicos – mas não conseguem identificar partículas específicas. No entanto, ferramentas de detecção de fluorescência como o NanoSight Pro da Malvern Panalytical aplicam comprimentos de onda específicos e filtros de fluorescência para detectar e analisar partículas rotuladas fluorescentes de interesse, desbloqueando novas possibilidades em sua pesquisa.

Como o NanoSight Pro mede fluorescência

O NanoSight Pro e seu software NS Xplorer empregam NTA ao combinar iluminação a laser com uma câmera de alta sensibilidade para visualizar nanopartículas que dispersam a luz do laser e emitem fluorescência. Quando executado no modo fluorescência, funciona assim:

1. A luz de um laser excita as partículas em um comprimento de onda que corresponde ao pico de absorção do fluoróforo.
2. À medida que os fluoróforos emitem luz, um filtro de passagem longa permite que apenas o sinal de fluorescência alcance a câmera, bloqueando qualquer luz dispersa.
3. O software rastreia o movimento de cada partícula fluorescente ao longo do tempo, analisando seu movimento Browniano e relatando a distribuição de tamanho em alta resolução
4. Ao contar o número de partículas fluorescentes dentro de um volume conhecido, o NanoSight Pro determina a concentração de partículas.

Além disso, faz tudo isso em menos de 5 minutos.

Essa capacidade abre possibilidades empolgantes, permitindo que você analise partículas específicas, entenda biológicos, otimize formulações de medicamentos e até desenvolva ferramentas de diagnóstico.

Benefícios para pesquisa de vesículas extracelulares

A detecção de fluorescência pode ajudar a avançar na pesquisa dos pequenos biológicos que conhecemos como vesículas extracelulares (EVs). Detectar e analisar EVs é desafiador devido ao seu pequeno tamanho e à complexidade das amostras biológicas.

Rotulando seus biomarcadores de superfície com corantes fluorescentes ou anticorpos, o NanoSight Pro pode ajudá-lo a visualizar e rastrear seletivamente essas vesículas dentro de sua amostra.

Entender suas características fornece insights sobre os mecanismos de doenças e tem o potencial de revolucionar a maneira como diagnosticamos e tratamos doenças.

Aplicações em entrega de medicamentos

Em aplicações de entrega de medicamentos, as nanopartículas podem ser carregadas com agentes terapêuticos e rotuladas com fluoróforos para análise direcionada. O modo de fluorescência do NanoSight Pro capacita desenvolvedores de formulações a avaliar o sucesso de estratégias de purificação, avaliar modificações de superfície e confirmar a carga útil dos vetores de entrega de medicamentos. Em poucos minutos, pode fornecer insights detalhados sobre características específicas de LNPs enquanto simultaneamente relata sobre tamanho, polidispersidade, concentração ou título.

Essa validação direta e visual oferece aos pesquisadores um nível adicional de confiança em seus dados e formulações, garantindo que estejam prontos para o próximo passo: avaliação in vivo.

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