FAQ: Estimativa de peso molecular a partir de DLS?

Aqui está uma pergunta que encontrei recentemente e que achei que valia a pena postar aqui:

“Eu gostaria de usar os dados de tamanho de partículas para calcular uma estimativa do peso molecular. Você poderia me enviar algumas informações sobre isso? Por exemplo, devo usar o tamanho médio por número ou por volume ou por intensidade?”

Se você deseja usar os dados de tamanho para prever/estimar o peso molecular, eu recomendaria usar o tamanho da distribuição de intensidade. No entanto, se você tiver um pico amplo, então usar a distribuição de volume também pode fornecer insights úteis. Muitas vezes, se houver uma distribuição de várias espécies diferentes, o peso molecular estimado a partir da distribuição de volume lhe dará uma ideia de qual é a menor parte da distribuição.  Por exemplo, para proteínas, se houver um equilíbrio monômero-dímero, a estimativa a partir da intensidade dará um peso molecular médio em algum lugar entre os dois, entretanto, ao usar a estimativa a partir do volume, isso será muito próximo do peso molecular do monômero.

 Você pode então inserir esses números no estimador de peso molecular dentro do software Zetasizer em Ferramentas → Calculadoras → aba Estimativas de MW & Forma para obter o peso molecular, por exemplo, para o raio de 8nm. Na captura de tela, o calculador é mostrado para o raio de 8nm. Aqui, a estimativa para o peso molecular de uma molécula semelhante a um polissacarídeo linear seria esperada para ser 88kDa. Se a molécula fosse esperada para ser mais como um polissacarídeo ramificado, o 8nm corresponderia a uma estimativa de 207kDa. Esta é uma estimativa, e tipicamente isso é bom dentro de ~20%, no entanto, pode haver casos de desvio maior para outras formas moleculares.

A nota técnica intitulada ‘Introdução às calculadoras no software Zetasizer‘ mostra um pouco do contexto e referências por trás das várias calculadoras disponíveis no software, um resumo das informações também está disponível no sumário intitulado “FAQ Pode o MW ser medido com DLS?”

As unidades para o peso molecular (ou mais corretamente: a massa molar) no calculador são kilo Dalton [kDa], que é o mesmo que kg/mol. 1 kDa é o mesmo que 1000 Da ou 1000 g/mol.

Anteriormente

• Intensidade – Volume – Número: qual tamanho é correto?
• Meça (ao invés de estimar) o peso molecular com cromatografia (demonstração de software, 3min)
• Como o DLS funciona?

Se você tiver alguma pergunta, por favor me envie um email para ulf.nobbmann@malvern.com. Obrigado!
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