Cómo detectar la fluorescencia en nanopartículas

Como Gerente de Producto de NanoSight Pro, he estudiado extensamente las nanopartículas y he visto cómo la detección de fluorescencia se ha convertido en un gran avance para el análisis de nano- y biopartículas. Como una extensión de las técnicas tradicionales de dispersión de luz, la fluorescencia puede apoyar tu investigación y proporcionar aún más información detallada.

NanoSight Pro aprovecha estas ventajas para ofrecer información detallada sobre el tamaño, la concentración y la identidad de las nanopartículas: información invaluable en campos que van desde la biofísica hasta la nanomedicina. Sigue leyendo para descubrir cómo.

¿Qué es la fluorescencia?

Estas moléculas absorben la luz mientras ganan energía. Pero, al igual que el balón de fútbol, no pueden retener esa energía por mucho tiempo. Casi de inmediato, liberan la energía extra emitiendo luz. Esta luz emitida es lo que llamamos fluorescencia. La luz liberada tiene una longitud de onda más larga y suele tener un color diferente al de la luz absorbida.

El poder de la detección de fluorescencia

Detectar la fluorescencia de nano- y biopartículas puede aumentar significativamente nuestra capacidad para analizar sus subpoblaciones. Al unir fluoróforos a nanopartículas, podemos etiquetarlas y rastrearlas usando análisis de seguimiento de nanopartículas (NTA), al igual que un sistema GPS puede monitorear la posición de objetos.

Técnicas existentes como la Dispersión Dinámica de Luz utilizan láseres para iluminar nanopartículas y pequeños biológics, pero no pueden identificar partículas específicas. Sin embargo, herramientas de detección de fluorescencia como el NanoSight Pro de Malvern Panalytical aplican longitudes de onda láser específicas y filtros de fluorescencia para detectar y analizar partículas etiquetadas fluorescentes de interés, desbloqueando nuevas posibilidades en tu investigación.

Cómo mide la fluorescencia NanoSight Pro

NanoSight Pro y su software NS Xplorer emplean NTA combinando iluminación láser con una cámara de alta sensibilidad para visualizar nanopartículas que dispersan la luz láser y emiten fluorescencia. Al funcionar en modo fluorescencia, así es como funciona:

1. La luz de un láser excita las partículas en una longitud de onda que coincide con el pico de absorción del fluoróforo.
2. A medida que los fluoróforos emiten luz, un filtro de paso largo permite que solo la señal de fluorescencia llegue a la cámara, bloqueando cualquier luz dispersa.
3. El software rastrea el movimiento de cada partícula fluorescente a lo largo del tiempo, analizando su movimiento browniano e informando sobre la distribución de tamaño de alta resolución.
4. Al contar el número de partículas fluorescentes dentro de un volumen conocido, NanoSight Pro determina la concentración de partículas.

Además, todo esto se realiza en menos de 5 minutos.

Esta capacidad abre posibilidades emocionantes, permitiéndote analizar partículas específicas, entender biológicos, optimizar formulaciones de fármacos, e incluso desarrollar herramientas de diagnóstico.

Beneficios para la investigación de vesículas extracelulares

La detección de fluorescencia puede ayudar a avanzar en la investigación de los pequeños biológicos que conocemos como vesículas extracelulares (EVs). Detectar y analizar EVs es un desafío debido a su pequeño tamaño y la complejidad de las muestras biológicas.

Configurando biomarcadores de superficie con colorantes fluorescentes o anticuerpos, NanoSight Pro puede ayudarte a visualizar y rastrear selectivamente estas vesículas dentro de tu muestra.

Entender sus características proporciona información sobre mecanismos de enfermedades y tiene el potencial de revolucionar cómo diagnosticamos y tratamos enfermedades.

Aplicaciones en administración de fármacos

En aplicaciones de administración de fármacos, las nanopartículas pueden ser cargadas con agentes terapéuticos y etiquetadas con fluoróforos para análisis dirigidos. El modo de fluorescencia del NanoSight Pro permite a los desarrolladores de formulaciones evaluar el éxito de las estrategias de purificación, evaluar modificaciones de superficie y confirmar la carga útil de los vectores de administración de fármacos. En minutos, puede proporcionar información detallada sobre características específicas de LNP mientras informa simultáneamente sobre tamaño, polidispersidad, concentración o título.

Esta validación directa y visual ofrece a los investigadores una capa adicional de confianza en sus datos y formulaciones, asegurándose de estar listos para el siguiente paso: evaluación in vivo.

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