Consejos para la limpieza de celdas ITC

Existen tres factores que afectan la limpieza.

・Líquido de limpieza (si tiene la capacidad de eliminar efectivamente la suciedad en la celda)

・Frecuencia (con qué frecuencia se realiza la operación de ‘limpieza’)

・Temperatura (a qué temperatura termostatear después de llenar ambas celdas con líquido de limpieza)

Se considera que la importancia es mayor en el orden de líquido de limpieza > frecuencia > temperatura. Se esbozará en el siguiente apartado.

Líquido de limpieza

El principio básico del líquido de limpieza es no disolver el equipo, sino disolver la suciedad.

Las celdas ITC están hechas de Hastelloy C276, y además se utilizan resinas plásticas y acero inoxidable como materiales de soporte. Al utilizar líquidos de limpieza, asegúrese de elegir líquidos que no corroen ni disuelven estos materiales. Recomendamos 14% DECON90 (o 20% Contrad70), y el uso de otros líquidos conlleva ciertos riesgos mencionados anteriormente.

Con muestras estándar como proteínas y ácidos nucleicos, la solución recomendada de 14% DECON90 puede tratar la mayoría de las suciedades. En dispositivos nuevos o mantenidos regularmente, la solución al 14% de DECON90 es adecuada en la mayoría de los casos.

Sin embargo, dependiendo del grado o tipo de suciedad, la limpieza con DECON90 puede no ser efectiva para su eliminación. Por ejemplo, recientemente, algunos clientes han estado usando compuestos de bajo peso molecular con alta hidrofobicidad como muestra. Se ha confirmado que la limpieza con una solución al 50% de DMSO es efectiva cuando la suciedad en la celda es problemático. Otros líquidos de limpieza pueden ser seleccionados de acuerdo con el propósito específico:

・14% (v/v) solución acuosa de DECON90

・Solución acuosa de 1-5N NaOH

・50% (v/v) solución acuosa de DMSO

・Detergente para vajillas diluido

・Limpiador de tuberías diluido al doble (Johnson Co. Pipe-Unish)

・1% (w/v) solución acuosa de ácido cítrico

・Detergente con enzimas proteolíticas

Frecuencia

Con el mismo líquido de limpieza y condiciones de remojo, puede ser posible eliminar la suciedad con varias repeticiones. Especialmente cuando la suciedad se ha acumulado, una sola limpieza puede ser insuficiente. Evalúe la efectividad de la limpieza por titulación de agua-agua, y repita varias veces con el líquido que muestra un efecto para restaurar completamente el estado óptimo de la línea base y el termograma de titulación.

Temperatura

Al igual que con los detergentes domésticos, para suciedades resistentes, calentar el líquido de limpieza durante la limpieza puede aumentar la efectividad. Bajo condiciones de alta temperatura, puede haber daños por corrosión en la celda, así que verifique siempre la resistencia química de la unidad de celdas a los productos químicos que utiliza, a través de literatura. La información sobre materiales (metales, resinas plásticas) de la unidad de celdas está en el apéndice del manual del usuario del dispositivo (en inglés). Si tiene dudas, por favor pregunte.

A continuación se detalla un método específico de limpieza.

・Los líquidos de limpieza pueden ser bases fuertes o perjudiciales. Al operar, asegúrese de llevar equipo de protección adecuado.

・El remojo prolongado conlleva el riesgo de olvido al enjuagar, así como solidificación de la solución, precipitación o adherencia de la suciedad.

En el peor de los casos, existe el riesgo de causar daños irreversibles en la celda. Realice las operaciones principalmente bajo su propia responsabilidad.

Dependiendo del grado de suciedad, cambie la solución después de un máximo de una hora. No deje en remojo toda la noche por favor.

・Líquido de limpieza

・Aguja de jeringa para gases

・Dispositivo de limpieza (para clientes que usan VP-ITC. ThermoVac incluido con el dispositivo, herramienta de limpieza capaz de enviar solución a la celda de muestra)

・Jeringa cosmética (jeringa para divisiones cosméticas, disponible en tiendas de todo a 100 yenes. La punta está cortada plana, las jeringas de 20 mL son convenientes)

・14% solución acuosa de DECON90 (efectiva para proteínas y otras suciedades, solución de limpieza recomendada para mantenimiento regular. Temperatura máxima de remojo a 60°C, no más de 1 hora)

・5N-NaOH solución acuosa (efectiva para proteínas, péptidos, ácidos nucleicos, etc. Temperatura máxima de remojo a 60°C, no más de 1 hora)

・50% solución acuosa de DMSO (efectiva cuando se usan compuestos de bajo peso molecular con alta hidrofobicidad. Temperatura máxima de remojo a 50°C, no más de 30 minutos)

Otros líquidos de limpieza con resultados demostrados:

・Detergente para vajillas diluido (aproximadamente 2 a 5 veces. Efectivo para lípidos y otras grasas. Palabras clave en el envase que indiquen su efectividad para eliminar grasas, temperatura máxima de remojo a 50°C, no más de 30 minutos)

・Limpiador de tuberías diluido al doble (efectivo para sustancias y manchas coloreadas, proteínas, etc. Pipe-Unish Pro, temperatura máxima de remojo a 50°C, no más de 30 minutos)

・1% ácido cítrico (suciedad soluble en ácido, incluye muestras con Ca o Mg en el tampón, temperatura máxima de remojo a 50°C, no más de 30 minutos)

・1% Zymit (detergente enzimático con proteasas. Compre concentrado y diluya a la concentración indicada por el fabricante, temperatura máxima de remojo a 25°C, no más de 12 horas)

1) Retire el agua ultrapura de ambas celdas de Muestra/Referencia. Quite el tapón de la celda de Referencia.

2) Use una aguja de jeringa para gases para llenar ambas celdas con líquido de limpieza (hágalo de la misma manera que al llenar la celda con muestra).

3) Realice lentamente un bombeo para permitir que el líquido de limpieza penetre en toda la celda.

4) Deseche todo el líquido de limpieza de ambas celdas.

5) Llene nuevamente ambas celdas con líquido de limpieza (retire tanto como sea posible el exceso de líquido, igual que al cargar la muestra).

6) Ajuste la temperatura de las celdas a la temperatura objetivo.

7) Cubra el puerto de la celda con una toalla de papel u otro material para evitar que entren partículas.

8) Deje en remojo durante 10 minutos a un máximo de 1 hora, dependiendo del grado de suciedad.

9) Una vez finalizado el remojo, regrese la temperatura de las celdas a 25°C (atención: si la jeringa se inserta mientras el líquido de limpieza aún está caliente, puede romper la jeringa o el contenido puede salir disparado de la celda).

10) Usando una jeringa para gases, retire con cuidado el líquido de limpieza que ha vuelto a temperatura ambiente, y enjuague sembrando con agua ultrapura de inmediato.

11) Use la jeringa de gases para llenar ambas celdas con agua ultrapura y realice lentamente el bombeo ascendente y descendente varias veces para enjuagar toda la celda.

12) Enjuague al menos 50-100 mL en total por cada una de las celdas de Muestra/Referencia usando agua ultrapura; para la celda de Muestra, el dispositivo de limpieza es conveniente.

13) Asegúrese de enjuagar también cualquier líquido de limpieza que pueda haber en el área del casquete de la celda de Muestra, y en el área donde se coloca el tapón de Referencia.

14) Cuando inserte la aguja de la jeringa de gases en la celda, hágalo lentamente. Si la punta metálica golpea el fondo de la celda con fuerza, puede rayar la superficie de la celda, causando ruido o incluso fallas. Al inyectar agua para el enjuague, asegúrese de que la cantidad no sea excesiva para evitar desbordes en el puerto de la celda.

15) Una vez finalizado el enjuague, llene ambas celdas con agua ultrapura.

・Asegúrese de que ambas celdas estén bien enjuagadas con agua ultrapura. También es efectivo usar ThermoVac/ el dispositivo de limpieza para la celda de Muestra.

Sin embargo, la celda de Referencia no puede enjuagarse, por lo que asegúrese de enjuagar igual que para la celda de Muestra.