Use of the new MicroCal PEAQ-ITC system for measurement and characterization of a broad range of protein-LMW compound interactions
화이트 페이퍼
MicroCal 기술인 PEAQ-ITC는 생체분자 상호작용의 용액 연구에서 라벨이 필요 없는 고감도, 저용량 등온 적정 열량계입니다. 단일 실험에서 결합 매개 변수를 직접 측정하고 최소 10µg의 시료만을 사용하여도 친화도가 약하거나 높은 결합제를 모두 분석할 수 있습니다. 반자동 유지보수는 작업자 간섭을 최소화하고 시스템을 완전 자동화된 PEAQ-ITC Automated로 업그레이드할 수 있으며, 이 시스템은 향후 많은 작업량을 처리해야 하고 처리 속도와 감도가 다른 무엇보다도 중요한 실험실에 적합합니다.
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MicroCal PEAQ-ITC은 간편한 사용과 뛰어난 감도를 제공하도록 설계되었습니다. 이 시스템은 생화학적 결합 반응 동안 방출되거나 흡수된 열을 직접 측정하고 결합 친화도(KD), 화학량론(n), 엔탈피(ΔH) 및 엔트로피(ΔS)를 산출합니다. 최소한의 시료 준비로 시스템 최적화 데이터를 빠르고 쉽게 생성합니다. 친화도 범위가 넓으므로 탁월한 재현성을 바탕으로 약하거나 높은 친화도를 가진 결합제를 모두 분석할 수 있습니다. MicroCal ITC는 높은 민감성과 빠른 결과가 무엇보다 중요한 생체 분자 상호 작용을 연구하는 실험실에서 핵심적인 도구입니다.
저분자, 단백질, 항체, 핵산, 지질 및 다른 생체 분자의 분자 상호 작용 분석을 포함하여 다양한 응용 분야를 MicroCal PEAQ-ITC로 조사할 수 있습니다. 또한 효소 반응 속도를 측정하는 데 사용할 수 있습니다.
MicroCal PEAQ-ITC 분석 소프트웨어로 실험 디자인 시뮬레이션, 대규모 데이터 세트에 대한 배치 평가, 자동식 데이터 질 평가 등을 수행할 수 있으며, 사용자가 빠르고 쉽게 최종 결과물을 얻도록 효율화된 사용자 인터페이스 및 양질의 프리젠테이션 그래프를 이용할 수 있습니다.
등온 적정 미세 열량측정계는 두 분자가 상호 작용할 때 발생하는 열 변화를 측정합니다. 상호 작용하는 분자가 자유 상태에서 결합 상태로 전환되면 비공유 결합의 재배치 및 형성의 결과로 열이 흡수되거나 방출됩니다. ITC는 셀 가열기에 적용된 차동 전력을 측정하여 열 변화를 모니터링하고 결합 파트너가 혼합됨에 따라 기준 셀과 샘플 셀 간에 영의 온도차를 유지해야 합니다. 기준 셀은 대개 물을 포함하지만, 샘플 셀은 결합 매개 변수(샘플, 단, 생체 분자일 필요는 없음) 중 하나와 다른 결합 파트너(리간드)를 보유한 교반 주사기를 포함합니다 리간드 농도가 샘플 농도의 2 ~ 3배가 될 때까지 리간드는 보통 0.5 ~ 2μL 소량으로 샘플 셀에 주입합니다. 각 리간드 주입 시 열 펄스가 발생하고 시간에 따라 통합되며 농도에 대해 정규화됨에 따라 kcal/mol 대 분자비(리간드/샘플)의 적정 곡선이 생성됩니다. 등온선을 결합 모델에 맞추어 조정하고 친화도(KD), 화학량론(n) 및 상호 작용에 대한 엔탈피(ΔH)를 생성합니다.
| 측정 유형 | 친화도(KD)
엔탈피 ∆H 엔트로피 ∆S 화학량론(n) |
|---|---|
| 시료 용량 | 280 µL |
| 셀 용량 | 200 µL |
| 샘플 주입 주사기 용량 | 40 µL |
| 샘플 주입량 결정 | < 1%(2μL 기반) |
| 샘플 처리량 | 하루 8시간당 0 ~ 12 |
| 셀 물질 | 하스텔로이 |
| 셀 | 동전 모양 |
| 잡음(Noise) | 0.15 ncal/s |
| 온도 범위 | 2 °C ~ 80 °C |
| 온도 안정성 | ± 0.00012°C |
| 반응 시간 | 8 s* |
| 다중 피드백 모드 | 예(수동, 하이 게인, 로우 게인) |
| 참고 | *MicroCal PEAQ-ITC의 기기 반응 시간은 완벽히 일정합니다. 이 반응 시간은 베이스라인에서부터 첫 번째 편차와 63%의 최대 피크 높이인 피크 지점 간의 시간 간격입니다. |
| 작동 온도 (°C) | 10°C ~ 28°C |
|---|---|
| 습도 | 0% ~ 70% RH(비응축) |
| 전원 | 100 - 240 VAC(전원 어댑터), 24 VDC(계측기 전원 공급 장치)
50/60Hz, 150W |
|---|---|
| 무게 | 13.6 kg |
| 크기(W, D, H) | 43 x 38 x 46 cm (열량측정계 + 세척 스테이션) |
MicroCal PEAQ-ITC 기기는 다양한 응용 분야에서 가치를 제공하며, 그중 일부는 아래와 같습니다.
ITC는 생물학적 상호작용의 친화도와 화학양론을 매우 정확하게 측정하는 데 이상적입니다. 상호작용하는 분자의 표지나 고정화가 필요하지 않으며 분자 질량 제한이 없습니다. ITC는 단백질, 핵산, 항체, 탄수화물, 지질, ATP, 저해제 및 의약 화합물 등 다양한 생물학적 상호작용 연구에 사용되어 왔습니다.
리간드는 어디에 결합하는가? 활성 부위인가? 알로스테릭 부위인가? 다른 리간드 및 보조인자와 비교했을 때 경쟁적, 비경쟁적 또는 불경쟁적인가? 결합이 협력적인가?
ITC는 이러한 결합 및 상호작용 메커니즘에 대한 중요한 통찰을 제공합니다.
효소를 분석하기 위한 간단한 실험 방법이 있는가? 실험 과정이 복잡한가? 기질을 변형하면 SAR 또는 기전 연구에 영향을 미치는가?
ITC는 모든 효소 반응을 연구하는 데 사용할 수 있으며, 나노그램에서 피코그램 수준의 적은 시료만 필요하며 표지 없이도 분석이 가능합니다.
ITC는 계면활성제, 블록 공중합체, 계면활성 펩타이드 및 단백질, 아미노산 기반 계면활성제 및 아미노기 기능성 지질을 포함한 다양한 미셀 복합체의 CMC를 결정하는 데 광범위하게 사용됩니다.
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| 플래티넘 플랜 | 골드 플랜 | 브론즈 방문 플랜 | |
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| 연례 PM/PV 테스트 |
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| 전화 / 이메일 지원 |
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| 우선 지원 |
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| 긴급 고장 방문* |
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| 부품 포함 |
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| 기술 및 소프트웨어 지원 |
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| IQ/OQ(제약)*** |
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*인건비 및 출장비 포함***추가 비용으로 이용 가능
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