Visão geral
O MicroCal PEAQ-ITC Automated combina a alta sensibilidade do MicroCal PEAQ-ITC, que é o calorímetro principal do sistema, com facilidade de automação, para atender às necessidades de produtividade dos laboratórios de pesquisa e descoberta de drogas.
O sistema mede diretamente o calor liberado ou absorvido durante os eventos de ligação bioquímica, a partir dos quais ele mede a afinidade de ligação (KD), a estequiometria (n), a entalpia (ΔH) e a entropia (ΔS).
Além de preparar amostras e reagentes em concentrações apropriadas, há um desenvolvimento de análise mínima, e o tempo até o primeiro resultado é rápido. O software fácil de usar inclui scripts de automação otimizada para operação robusta com uma variedade de tipos e condições de amostra.

Recursos e benefícios
- As ferramentas de design fáceis de usar auxiliam na seleção dos parâmetros de execução experimentais.
- Todos os parâmetros de ligação (afinidade, estequiometria, entalpia e entropia) em um único experimento.
- Rápido até o primeiro resultado, com desenvolvimento de análise mínima, sem identificação, nenhuma imobilização e nenhum limite de peso molecular.
- A alta sinalização ao barulho proporciona confiança no acesso à qualidade dos dados, além de relevância da afinidade gerada e dos parâmetros termodinâmicos.
- Qualidade de dados excelente para constantes de dissociação submilimolar a picomolar (10-2 a 10-12 M).
- A célula em formato de moeda otimiza a mistura de amostras.
- Hastelloy não reativo para resistência química e compatibilidade com amostras biológicas.
- Sensibilidade para investigar qualquer interação biomolecular usando apenas 10 µg de proteína.
- Amostras apresentadas em placa de 96 poços com temperatura controlada.
- Sistema totalmente automatizado com operação fácil para maior produtividade.

Como funciona
Os microcalorímetros de titulação isotérmica medem a mudança de calor que ocorre quando duas moléculas interagem. O calor é liberado ou absorvido como resultado da redistribuição e formação de ligações não covalentes quando as moléculas que estão interagindo vão do estado livre para o estado ligado.
A ITC monitora essas mudanças de calor medindo a potência diferencial, aplicada aos aquecedores de célula, exigidos para manter a diferença de temperatura em zero entre as células de referência e as de amostra uma vez que os parceiros de ligação estão misturados.
A célula de referência normalmente contém água, enquanto a célula de amostra contém um dos parceiros de ligação (a amostra, que, frequentemente, embora nem sempre, é uma macromolécula) e uma seringa de agitação que contém o outro parceiro de ligação (o ligando).

O ligando é injetado na célula de amostra, tipicamente em porções de 0,5 a 2 μL, até que a concentração do ligando seja de duas a três vezes maior do que a amostra.
Cada injeção de ligante resulta em um pulso de calor que é integrado com relação ao tempo e normalizado para concentração para gerar uma curva de titulação de kcal/mol vs proporção molar (ligante/amostra).
A curva isotérmica resultante é ajustada a um modelo de ligação para gerar a afinidade (KD), a estequiometria (n) e a entalpia de interação (ΔH).

Software de análise
O software MicroCal PEAQ-ITC Analysis oferece simulação de design de experimentos, avaliação em lote de grandes conjuntos de dados, avaliação automatizada da qualidade dos dados, além de interface de usuário simplificada para guiar o usuário até os valores finais e os gráficos de qualidade de apresentação, com rapidez e facilidade.
- Abra vários experimentos em uma única sessão.
- Compatível com muitos modelos de encaixe automatizado.
- Dissociação.
- Cinética enzimática - várias injeções.
- Cinética enzimática - injeção única.
- Um conjunto de locais de ligação.
- Locais de ligação sequenciais.
- Um conjunto de locais - SIM.
- Dois conjuntos de locais de ligação.
- Competitivo.
- Avaliação automatizada da qualidade dos dados.
- Boa qualidade dos dados - com ligação.
- Boa qualidade de dados - sem ligação.
- Baixa qualidade dos dados - verificar dados.

Very good instrument, fast and easy to use."
Clarissa Melo Czekster — University of St Andrews