A customer perspective on hit validation in fragment based drug discovery
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O PEAQ-ITC Automated, uma tecnologia MicroCal, é um calorímetro de titulação isotérmica configurável, altamente sensível e de baixo volume, que oferece a praticidade das operações autônomas.
Ele fornece medição direta e sem identificação na solução de todos os parâmetros de ligação em um único experimento. As aplicações incluem caracterização de interações de pequenas moléculas, proteínas, anticorpos, ácidos nucleicos, lipídeos e outras biomoléculas. Também pode ser usado para medir a cinética enzimática.
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O MicroCal PEAQ-ITC Automated combina a alta sensibilidade do MicroCal PEAQ-ITC, que é o calorímetro principal do sistema, com facilidade de automação, para atender às necessidades de produtividade dos laboratórios de pesquisa e descoberta de drogas.
O sistema mede diretamente o calor liberado ou absorvido durante os eventos de ligação bioquímica, a partir dos quais ele mede a afinidade de ligação (KD), a estequiometria (n), a entalpia (ΔH) e a entropia (ΔS).
Além de preparar amostras e reagentes em concentrações apropriadas, há um desenvolvimento de análise mínima, e o tempo até o primeiro resultado é rápido. O software fácil de usar inclui scripts de automação otimizada para operação robusta com uma variedade de tipos e condições de amostra.
Os microcalorímetros de titulação isotérmica medem a mudança de calor que ocorre quando duas moléculas interagem. O calor é liberado ou absorvido como resultado da redistribuição e formação de ligações não covalentes quando as moléculas que estão interagindo vão do estado livre para o estado ligado.
A ITC monitora essas mudanças de calor medindo a potência diferencial, aplicada aos aquecedores de célula, exigidos para manter a diferença de temperatura em zero entre as células de referência e as de amostra uma vez que os parceiros de ligação estão misturados.
A célula de referência normalmente contém água, enquanto a célula de amostra contém um dos parceiros de ligação (a amostra, que, frequentemente, embora nem sempre, é uma macromolécula) e uma seringa de agitação que contém o outro parceiro de ligação (o ligando).
O ligando é injetado na célula de amostra, tipicamente em porções de 0,5 a 2 μL, até que a concentração do ligando seja de duas a três vezes maior do que a amostra.
Cada injeção de ligante resulta em um pulso de calor que é integrado com relação ao tempo e normalizado para concentração para gerar uma curva de titulação de kcal/mol vs proporção molar (ligante/amostra).
A curva isotérmica resultante é ajustada a um modelo de ligação para gerar a afinidade (KD), a estequiometria (n) e a entalpia de interação (ΔH).
O software MicroCal PEAQ-ITC Analysis oferece simulação de design de experimentos, avaliação em lote de grandes conjuntos de dados, avaliação automatizada da qualidade dos dados, além de interface de usuário simplificada para guiar o usuário até os valores finais e os gráficos de qualidade de apresentação, com rapidez e facilidade.
Very good instrument, fast and easy to use."
Clarissa Melo Czekster — University of St Andrews
| Tipo de medição | Afinidade (KD)
Entalpia ∆H Entropia ∆S Estequiometria (n) |
|---|---|
| Capacidade de amostras | 384 (quatro placas de 96 poços) |
| Faixa de temperatura da bandeja de amostra | 4°C ± 2°C em temperatura ambiente |
| Volume da amostra | 370 µL |
| Volume da célula | 200 µL |
| Volume da seringa de injeção | 40 µL |
| Precisão de volume de injeção | < 1% @ 2 µL |
| Rendimento | Até 42 por 24 horas (SIM) |
| Material da célula | Hastelloy |
| Célula | Em formato de moeda |
| Ruído | 0.15 ncal/s |
| Faixa de temperatura | 2°C a 80°C |
| Estabilidade da temperatura | ±0.00012°C |
| Tempo de resposta | 8 s* |
| Modos de feedback múltiplos | Sim (passivo, ganho alto, ganho baixo) |
| Observações | *O tempo de resposta do instrumento MicroCal PEAQ-ITC é uma constante de tempo real. É o intervalo de tempo entre o primeiro desvio da linha de base e o ponto no pico que seja 63% da altura máxima do pico. |
| Temperatura (em operação) | 10 °C a 28 °C |
|---|---|
| Umidade | 0% a 70% RH, sem condensação |
| Alimentação elétrica | 100 - 240 V, 50/60 Hz, 400 W |
|---|---|
| Peso | 91 kg |
| Dimensões (L, P, A) | Totalmente montado: 61 x 58 x 76 cm
Calorímetro: 17 x 36 x 16 cm |
Os instrumentos MicroCal PEAQ-ITC agregam valor a uma ampla gama de aplicações, algumas das quais são descritas abaixo.
Central para programas de validação de acertos e otimização de leads é a obtenção de medições de afinidade e estequiometrias precisas. Como o ITC não requer marcação ou imobilização, não tem limitações de massa superior ou inferior ou requisitos de tampão, é universalmente aplicável para determinar afinidades muito precisas para qualquer interação proteína:medicamento, incluindo moléculas pequenas e produtos biológicos.
O ITC é um elemento-chave na caixa de ferramentas do biólogo estrutural. Não apenas para medições quantitativas de atividade estrutural, mas também para a otimização de condições de cocristalização.
| Título | Versão | Data | Download |
|---|---|---|---|
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| Plano Platinum | Plano Gold | Visita Bronze | |
|---|---|---|---|
| Teste Anual de PM/PV |
Sim
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Sim
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| Telefone / Email do Suporte |
Sim
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| Atendimento Prioritário |
Sim
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Sim
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| Visitas de Emergências* |
Sim
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| Inclui peças |
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| Suporte Técnico e Software |
Sim
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Sim
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Sim
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| IQ/OQ (Farma)*** |
Sim
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Sim
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Sim
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*inclui diárias & gastos de viagem***disponível por um custo adicional
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