Guía de cinética: cinética de unión con el WAVEsystem

Todos los productos de Creoptix se han diseñado pensando en la experiencia del usuario. Al mismo tiempo, se trata de instrumentos bioanalíticos altamente sofisticados que requieren la intervención de un usuario experto. 

Para ayudarlo a sacar el máximo partido a su producto, hemos combinado la riqueza de nuestros conocimientos y experiencia internos en un manual de referencia práctico. Nuestros expertos lo guiarán a través de los principios más importantes en los que se basan las tecnologías, técnicas y aplicaciones. Proporcionamos información, consejos y sugerencias sobre el diseño experimental y el análisis de datos. En una sección de solución de problemas independiente, se cubren las situaciones y preguntas que nuestros equipos de Atención al Cliente suelen encontrar con más frecuencia.

Tanto si lo lee de principio a fin, como si lo consulta por preguntas específicas o lo guarda como un recordatorio práctico de ecuaciones y protocolos, esperamos que este manual lo ayude en su trabajo y contribuya a obtener resultados que aceleren el descubrimiento.

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¿Qué incluye la guía?

Contenido	Página
1. Bienvenida	5
2. Introducción	7
2.1 Introducción al análisis de interacciones sin etiquetas	8
2.1.1 Definiciones de terminología sin etiquetas	12
2.1.2 Principios del análisis sin etiquetas	16
2.2 El WAVEsystem de Creoptix	19
2.2.1 Tecnología GCI	19
2.2.3 Microfluídicos sin obstrucción	21
2.2.3 GCI frente a otras tecnologías de biosensores sin etiquetas	24
2.3 Descripción general de las aplicaciones	26
2.3.1 Análisis de cinética y afinidad	26
2.3.2 Cribado molecular	29
2.3.3 Especificidad de unión	31
2.3.4 Análisis de concentración	32
3. Diseño experimental	34
3.1 Superficies del sensor	35
3.1.1 Selección del tipo de chip	35
3.1.2 Acondicionamiento de chips	40
3.1.3 Estrategias de inmovilización	41
3.1.4 Regeneración de superficie	51
3.1.5 Regeneración del ligando	53
3.2 Inmovilización del ligando	56
3.2.1 Densidad del ligando	56
3.2.2 Actividad del ligando	59
3.2.3 Limitación del transporte de masa	60
3.2.4 Avidez del ligando	61
3.2.5 Unión no específica	62
3.3 Amortiguador	63
3.3.1 Consideraciones generales	63
3.3.2 Composición del amortiguador	63
3.3.3 Comparación de amortiguador y muestra	67
3.4 Referencia y corrección	69
3.4.1 Referencia	69
3.4.2 Doble referencia	69
3.4.3 Corrección de DMSO (corrección de solvente)	70
3.5 Formato de ensayo	75
3.5.1 Análisis de cinética y afinidad	75
3.5.2 Cribado molecular	84
3.5.3 Especificidad de unión y experimentos de competencia	85
3.5.4 Análisis de concentración	87
3.5.5 Recuperación de muestras para la identificación de aglutinantes de analitos	91
4. Análisis de los datos	97
4.1 Ajuste de datos	98
4.1.1 Saltos de señal	99
4.1.2 Desviaciones	99
4.1.3 Corrección de DMSO (corrección de solvente)	100
4.1.4 Blancos	101
4.2 Evaluación de datos	102
4.2.1 Resultados y calidad de la evaluación	103
4.2.2 Ajustes y menú avanzado	105
4.2.3 Selección del modelo	109
4.2.4 Análisis de equilibrio	116
4.3 waveRAPID	117
4.4. Cribado	119
4.4.1 Ajustes	119
4.4.2 Gráfico de serie de datos	119
4.4.3 Clasificación y aciertos	120
4.4.4 Cribado fuera de rango	120
5. Solución de problemas	122
5.1 Fuga	123
5.2 Estado del dispositivo	123
5.3 Señal distorsionada	124
5.3.1 Señal ruidosa	124
5.3.2 Amplitudes inestables o bajas	125
5.3.3 Señal de espículas o pérdidas de fase	126
5.4 Inmovilización del ligando	127
5.4.1 Unión escasa	127
5.4.2 Baja actividad del ligando	128
5.5 Cinética	128
5.5.1 Sin señal sobreestequiométrica o de saturación	128
5.5.2 Sin señal de disociación o asociación lineal	129
5.5.3 waveRAPID	129
6. Referencias	130