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WAVEsystem: KYMAchip storage and reuse guide
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La próxima evolución del chip de sensor para el WAVEsystem, el KYMAchip, sigue ofreciendo una amplia compatibilidad de muestras y un diseño sin obstrucciones, ahora con canales definidos con más precisión para datos altamente coherentes.
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Nuestros cartuchos microfluídicos han permitido el análisis de interferometría acoplada a rejilla (GCI, del inglés “Grating-Coupled Interferometry”) biofísica en WAVEsystem durante años, lo que respalda aplicaciones que van desde partículas grandes hasta muestras crudas y proteínas de membrana. KYMchip, la próxima generación del WAVEchip, genera los mismos datos cinéticos de alta calidad que su predecesor, con un tiempo de ascenso reducido; las transiciones de señal son aún más nítidas que antes, lo que permite mediciones de unión más precisas. Su diseño de canal nuevo y mejorado reduce la variabilidad de canal a canal y da como resultado una mayor confianza en el análisis cinético, con más rapidez.
El KYMAchip se puede almacenar y volver a utilizar una y otra vez. Obtenga los beneficios del nuevo KYMchip sin comprometer la calidad de los datos ni cambiar sus flujos de trabajo existentes.
Los canales rediseñados permiten el cambio rápido entre el tampón y la muestra, lo que da como resultado transiciones de señal rápidas que admiten la medición exacta incluso de las tasas de disociación más rápidas (hasta 10 s⁻¹) y las interacciones complejas.
La robustez mejorada permite almacenar y reutilizar el KYMAchip, lo que preserva las propiedades microfluídicas confiables sin obstrucciones para un rango de aplicación más amplio, desde pequeñas moléculas hasta proteínas de membrana.
La arquitectura de canal definida con precisión reduce la variabilidad de canal a canal, lo que proporciona datos más reproducibles.
Las celdas de flujo paralelo del KYMAchip y los canales rediseñados optimizan aún más el cambio de tapón a muestra, lo que genera transiciones de muestras aún más rápidas para una mejor resolución temporal de eventos rápidos de asociación y disociación. Esto da como resultado sensogramas más claros y un análisis cinético más confiable para las interacciones de unión débil.
Los canales definidos con precisión del KYMAchip reducen la variabilidad de canal a canal, lo que proporciona lo siguiente:
Esto mejora la reproducibilidad entre réplicas, lo que proporciona parámetros cinéticos coherentes y agiliza el análisis de datos.
La coherencia del KYMAchip respalda la sensibilidad líder de la plataforma WAVEsystem: cinética de resolución de señales inferiores a 1 pg/mm² (1 RU), con un ruido inferior a 0,01 pg/mm² y una desviación inicial inferior a 0,3 pg/mm²/min, en proporciones de peso molecular entre ligandos y analitos de hasta 1000:1.
El innovador diseño fluídico del KYMAchip integra todos los microfluídicos dentro del chip, en lugar de hacerlo dentro de WAVEsystem. También ofrece válvulas estándar de gran diámetro en dirección descendente en el instrumento, en lugar de tener microválvulas cerca del chip.
El WAVEsystem ofrece una robustez de muestra sin procesar que se alcanza normalmente solo con ensayos basados en placas.
KYMAchip es compatible con una amplia gama de tipos de muestras, entre los que se incluyen los siguientes:
El cartucho químicamente resistente es compatible con solventes fuertes, lo que permite el uso de altas concentraciones de DMSO, acetonitrilo y otros solventes orgánicos típicos de las bibliotecas de fragmentos y detergentes viscosos. Esto permite la exploración de las condiciones de solubilización y purificación de las proteínas de la membrana, así como la caracterización confiable y segura de objetivos desafiantes.
Con una mayor robustez en comparación con el WAVEchip, el KYMAchip también se puede extraer del WAVEsystem y volver a insertarlo, lo que permite su almacenamiento y reutilización.
Los pasos de purificación que requieren mucho tiempo y las obstrucciones con frecuencia llevan otros sistemas fuera de línea.
Por el contrario, los microfluídicos sin obstrucciones del KYMchip manejan muestras crudas y complejas sin trabajo adicional para sus operadores, lo que proporciona datos rápidos y de alta calidad con una resolución superior en la señal y el tiempo.
| Sensor WAVEchip | Matriz de superficie del sensor | Modalidad de inmovilización | Aplicaciones sugeridas |
|---|---|---|---|
| PCP | Hidrogel de PCcuasiplanar | Acoplamiento de aminas | Ligandos o analitos de gran tamaño, como proteoliposomas/liposomas, virus y VLP |
| PCP-STA | Estreptavidina preinmovilizada
Hidrogel de PCcuasiplanar | Biotina | Ligandos biotinilados de gran tamaño y analitos como liposomas, virus y VLP |
| PCP-RST | Superficie de estreptavidina regenerable
Hidrogel de PCcuasiplanar | Biotina | Ligandos biotinilados de gran tamaño, cribado de ligandos |
| PCP-PAG | Proteína de fusión A/G preinmovilizada
Hidrogel de PCcuasiplanar | IgG | Para capturar el rango más amplio de IgG y proteínas etiquetadas con FC |
| PCP-NTA | NTA preinmovilizado
Hidrogel de PCcuasiplanar | Etiqueta His | Ligandos de gran tamaño marcados con etiqueta His y analitos como liposomas, virus y VLP |
| PCP-LIP | Grupos lipofílicos preinmovilizados
Hidrogel de PCcuasiplanar | Lípido | Ligandos hidrofóbicos (grandes) como liposomas, vesículas de membrana |
| PCZ | Funcionalizado con un polímero zwitteriónico que presenta ácidos carboxílicos y aminas terciarias en densidades similares, hidrogel de PC cuasiplanar | Acoplamiento de aminas | Baja unión inespecífica, ideal para el acoplamiento de proteínas con puntos isoeléctricos bajos o ligandos polianiónicos |
| PCL | Hidrogel grueso de PC de baja capacidad, con una menor cantidad de cargas negativas (aprox. un 25 %) | Acoplamiento de aminas | Matrices complejas, como suero o sobrenadante de cultivo. Requiere sulfo-NHS para la activación |
| PCH | Hidrogelgrueso de PC | Acoplamiento de aminas | Relación elevada entre el peso molecular del ligando y el del analito; uso general |
| PCH-NTA | NTA preinmovilizado
Hidrogelgrueso de PC | Etiqueta His | Ligandos etiquetados con His, uso general |
| PCH-STA | Estreptavidina preinmovilizada
Hidrogelgrueso de PC | Biotina | Ligandos biotinilados, uso general |
| PCH-RST | Superficie de estreptavidina regenerable
Hidrogelgrueso | Biotina | Ligandos biotinilados, cribado de ligandos |
| DXP | Hidrogel de DXcuasiplanar | Acoplamiento de aminas | Ligandos o analitos de gran tamaño, como proteoliposomas/liposomas, virus y VLP |
| DXH-STA | Estreptavidina preinmovilizada
Hidrogelgrueso de DX | Biotina | Ligandos biotinilados, uso general |
| DXH | Hidrogelgrueso de DX | Acoplamiento de aminas | Relación elevada entre el peso molecular del ligando y el del analito; uso general |
| PC- = policarboxilato, DX- = carboximetildextrano.
Los sensores con recubrimiento de DX están disponibles a pedido | |||
WAVEsystem: KYMAchip storage and reuse guide
Tanto los KYMAchips como los WAVEchips originales ofrecen lo siguiente:
El nuevo KYMchip ofrece lo siguiente:
Los KYMAchips son compatibles con una amplia variedad de muestras, entre las que se incluyen las siguientes:
Esto depende del tipo de chip, el método de inmovilización y el comportamiento del ligando. Los ligandos marcados con etiqueta His en superficies de Ni-NTA y los ligandos inmovilizados en superficies de proteína A/G pueden regenerarse y recapturarse múltiples veces. Los canales rediseñados del KYMAchip hacen que sea robusto, por lo que el chip se puede extraer, almacenar y reinsertar para su reutilización.
La capacidad de inmovilización depende del tipo de chip y del método de inmovilización. El chip de mayor capacidad de la cartera de productos de WAVEsystem, el 4PCH WAVEchip, puede inmovilizar hasta 35 000 pg/mm2 de BSA, pero la capacidad experimental depende del ligando exacto utilizado.
El software WAVEcontrol tiene incorporado un simulador que ayuda a determinar la densidad del ligando necesaria para una respuesta teórica aceptable.
| Título | Versión | Fecha | Descargar |
|---|---|---|---|
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La próxima generación de KYMAchip se basa en el rendimiento comprobado de WAVEchip, lo que ofrece transiciones de señal más nítidas, mayor coherencia y flexibilidad para almacenar y reutilizar