WAVEchip

Mida las muestras más difíciles

El innovador diseño fluídico integra todos los microfluídicos en el cartucho desechable (no dentro del núcleo del dispositivo) y coloca válvulas estándar de gran diámetro en los procesos posteriores del instrumento en lugar de tener microválvulas cerca del chip. 

Mediante la combinación de los microfluídicos y el biosensor óptico en un único cartucho desechable, el sistema WAVEsystem ofrece una consistencia de las muestras crudas que normalmente solo se consigue con ensayos basados en placas. Los tipos de muestra compatibles incluyen suero o plasma al 100 %, lisatos celulares, preparaciones de membranas crudas, objetivos de fármacos grandes, partículas similares a virus (VLP, del inglés virus-like particles), liposomas y agregados (fibrillas) sin riesgo de obstrucción.

El cartucho que admite productos químicos también permite que sea posible trabajar con altas concentraciones de DMSO, acetonitrilo y otros disolventes orgánicos típicos de las bibliotecas de fragmentos, y detergentes viscosos que permiten explorar las condiciones de solubilización y purificación de proteínas de membrana. Además, como los cartuchos son independientes y desechables, eliminan la contaminación cruzada, lo que protege las muestras y garantiza datos más confiables.

Sin microválvulas para transiciones rápidas

El diseño del cartucho permite tiempos de transición ultrarrápidos de 150 ms para una determinación confiable de constantes de disociación de 10 s–1 (semivida de 69 ms), lo que permite el estudio cinético de fragmentos de unión débil.

Sin obstrucciones para muestras crudas

Los microfluídicos sin obstrucciones se adaptan a una amplia gama de tipos de muestras para conservar la actividad y el contexto biológico, lo que ahorra tiempo en pasos de purificación perjudiciales y obstrucciones que hacen que otros sistemas queden fuera de línea.

Mediante la combinación de la tecnología patentada de interferometría acoplada a rejilla (GCI, del inglés Grating-Coupled Interferometry) con microfluídicos sin obstrucciones, el Creoptix^® WAVEsystem proporciona datos de alta calidad incluso de los tipos de muestra más exigentes y logra una resolución superior en términos de señal y tiempo en comparación con otras formas de cuantificación sin marcadores. La inmovilización del ligando sin marcadores se logra típicamente mediante el acople covalente del ligando al biosensor a través de grupos de amina (-NH₂), tiol (-SH₂), aldehído (-CHO) o carboxilato (-COOH) que se producen de forma natural, o a través de la unión del ligando a un anticuerpo que se ha unido de manera covalente a la superficie del biosensor. El mantenimiento de las muestras en condiciones fisiológicas y de configuración nativa reduce el riesgo de inactivación o desnaturalización de proteínas, lo que garantiza que los datos sin procesar generados sean una representación fiel de la actividad cinética. 

¿Con qué son compatibles los WAVEchips^®?

• Suero y plasma al 100 %, y precipitado celular
• Solventes no tradicionales, incluidos altos porcentajes de acetonitrilo y DMSO
  
• Detergentes viscosos y aditivos para solubilizar proteínas de membrana
  
• Preparaciones de membrana celular, parcialmente solubilizado, material no purificado
  
• Partículas similares a virus (VLP), liposomas o nanodizcos utilizados como estructuras de solubilización
  
• Moléculas de enlace grandes: preparaciones de nanopartículas y membrana cruda
  

¿Con qué frecuencia puedo utilizar los WAVEchips?

Esto depende del tipo de WAVEchip^®, del método de inmovilización utilizado y del comportamiento del ligando inmovilizado. Por ejemplo, las proteínas del ligando marcadas con histidina capturadas en una superficie de Ni-NTA pueden ser regeneradas por EDTA y el ligando se puede recapturar varias veces. Esto significa que se puede utilizar un chip de este tipo en general repetidamente, siempre que permanezca insertado en el Creoptix^® WAVEsystem. Son posibles las regeneraciones con chips de Ni-NTA y proteína A/G, lo que permite múltiples usos; sin embargo, esto no se logra fácilmente con estreptavidina u otros chips.

¿Cuánto ligando se puede inmovilizar en los chips?

La capacidad de inmovilización depende del tipo de chip y del método de inmovilización. El chip de mayor capacidad de la cartera de productos de Creoptix^® WAVEsystem, el 4PCH WAVEchip, puede inmovilizar hasta 35 000 pg/mm² de BSA, pero la capacidad experimental depende del ligando exacto utilizado. El software WAVEcontrol tiene incorporado un simulador que ayuda a determinar la densidad del ligando necesaria para una respuesta teórica aceptable.