La taille ou le rayon hydrodynamique RH peut être déterminée de deux façons. L'une des méthodes est la mesure par Diffusion dynamique de la lumière (DLS) qui est généralement utilisée comme une technique de laboratoire en batch pour mesurer la taille moyenne d'un échantillon entier. Elle peut aussi être utilisée comme détecteur en ligne pour la Chromatographie d'exclusion stérique (GPC/SEC).
Une autre méthode extrêmement précise pour obtenir le RH de tous les composants d'un échantillon est la mesure par triple détecteurs après séparation par SEC.
En utilisant des détecteurs de diffusion de lumière et des viscosimètres en ligne, la masse molaire (MW) et la viscosité intrinsèque du polymère ou de la protéine peuvent être déterminées et ainsi, le RH peut être calculé à n'importe quel endroit du chromatogramme.
L'avantage de ces deux techniques est que dans la pratique, il n'y a pas de taille supérieure ou inférieure limite pour les matériaux analysés.
Applications
La mesure de taille moléculaire est un paramètre utile pour un certain nombre d'applications :
- la comparaison de cette taille avec la masse molaire donne des informations sur la structure.
- la DLS peut utiliser la taille moléculaire pour donner une estimation rapide de la masse molaire.
- la DLS peut donner une évaluation rapide de la pureté de la protéine.
- la détermination du point de fusion de la protéine.
