抗體在血清中的親和力和動力學

如血清等複雜生物流體中無標記的分子交互作用量化，可提供引導治療性抗體研究的寶貴資訊。然而，由於許多成分皆會造成微流道之阻塞，這些基質往往會對光學生物感測器造成很大壓力。這可能會導致計畫延遲，因要進行必要的維護。 

採用創新拋棄式微流道，WAVE 可高度抗防阻塞。這使得動力學分析能盡可能在生理相關基質中進行，提供比傳統表面電漿共振 (SPR) 技術更優異的洞見。

透過在包含不同血清濃度的基質中測量 HER2 與 Trastuzumab 之間的交互作用，我們證明了具備無阻塞微流道技術的 WAVEsystem，可對結合於生物流體中的抗體進行可靠的動力學分析。 

在 4PCP WAVEchip 上，HER2-Fc 融合 (Sino Biological，CN) 透過胺耦合固定在 975 pg/mm² 的通道上，接著在所有通道上固定 BSA 鈍化 (Roche，CH)，以達到每個通道的 4200 pg/mm² 的總蛋白質。使用於所有實驗的電泳緩衝液 (RB) 為 (HBS-EP+ 加上 0.5% BSA)。Trastuzumab (Absolute Antibody，UK) 以 150 ul/min 注入 170 秒，接著進行 300 秒的解離步驟。針對 0% 血清之狀況，Trastuzumab 則製備於 100% RB 中，並自 20 nM 起稀釋 (4 倍連續稀釋)。 

針對 50% 血清之狀況，Trastuzumab 製備於 1:1 (v/v) 血清：RB 中自 100 nM 起。針對 90% 血清之狀況，Trastuzumab 製備於 9:1 (v/v) 血清：RB 自 100 nM 起。每次都會透過注入 50mM NaOH、1M NaCl 之脈衝來達成再生。評估期間會使用 DMSO 校正、雙重參照及大量修正來調整量測。

表 1：不同血清濃度下 HER2 與 Trastuzumab 之間的交互作用動力學數據。

圖 1：不同基質中 HER2 與 Trastuzumab 之間的交互作用感應圖