WAVEsystem
Instrumentos bioanalíticos de última geração para descoberta de medicamento...
A constante de associação é um parâmetro cinético usado para medir as interações intermoleculares e os eventos de ligação entre duas ou mais moléculas. A constante da taxa de associação (ka, kon ou dentro da taxa) é a taxa na qual uma molécula se liga à segunda para formar um complexo. Ela é registrada em moles (a quantificação padrão do número de moléculas) por segundo: M-1s-1.
Como você mede a constante de associação?
Ao analisar a cinética de ligação com alguns biossensores, como o WAVEsystem, uma tecnologia Creoptix, uma molécula será imobilizada na superfície do biossensor (o chip) e será denominada "ligante". A segunda molécula passa em um fluxo microfluídico e é chamada de "analito".
Imagem à direita: A curva resultante de uma medição de interação de ligação (um sensorgrama).
Primeiro, a linha de base é estabelecida com o fluxo do tampão passando pelo sensor com um ligante imobilizado. Depois disso, a amostra (substância a ser analisada, analito) passa pelo fluxo. O analito está associado ao ligante durante a fase de associação. A partir daí, a constante de associação pode ser calculada, como a taxa na qual o analito se liga ao ligante para formar um complexo na concentração padrão. É por isso que ela é expressa em moles por segundo.
Juntas, a taxa de associação e a taxa de dissociação (kd) definem a afinidade (constante de dissociação de equilíbrio, KD) e determinam a cinética de ligação (a interação dinâmica entre duas moléculas). A KD é calculada como kd/ka e determina a concentração de analito na qual metade dos ligantes é ocupada pelo analito em equilíbrio.
Como você mede as constantes de associação com o WAVEsystem?
A medição precisa e eficiente das interações intermoleculares e dos eventos de ligação é um elemento essencial de uma ampla variedade de pesquisas básicas e um componente indispensável dos programas de descoberta de medicamentos.
O WAVEsystem é um biossensor óptico que pode medir a constante de associação à medida que mede a cinética de ligação.
| Especificação | WAVE | WAVEdelta |
|---|---|---|
| Const. de associação Faixa |
ka = 103 – 5x107 M-1 s–1 (moléculas pequenas)
|
ka = 103 – 5x107 M-1 s–1 (moléculas pequenas)
|
Que outros métodos posso usar para medir a constante de associação?
Comparação entre a Interferometria de biocamada (BLI), a Ressonância plasmônica de superfície (SPR) e a Interferometria acoplada a grade (GCI)
Além do WAVEsystem, que usa interferometria acoplada à grade (GCI), os métodos comuns para medir a constante de associação são a interferometria de biocamada (BLI) ou a ressonância plasmônica de superfície (SPR).
Em nossa página de comparação de tecnologias, você pode saber mais sobre os recursos da BLI em comparação com a SPR e a GCI.
