As técnicas sem identificação na análise de solução são usadas no estudo direto de moléculas nativas. Elas geram dados biologicamente relevantes que permitem o entendimento das interações moleculares sem usar sondas artificiais ou identificações. Esta é a principal vantagem uma vez que as identificações podem interromper a estrutura de ordem maior que é crucial para a ligação, introduzir artefatos nos dados e até mesmo desativar ou desestabilizar a molécula de interesse.

A microcalorimetria é uma técnica de análise poderosa, bem estabelecida e sem identificação na solução. Os microcalorímetros são usados para detectar a associação e a dissociação de complexos moleculares, medindo as alterações no calor liberado ou absorvido. Os dados ricos em informações resultantes fornecem visões sobre os processos biológicos e os mecanismos que conduzem interações moleculares. As tecnologias sem identificação são atrativas aos pesquisadores por meio de uma gama diversa de aplicativos como: pesquisa biológica, desenvolvimento e descoberta de medicamentos de moléculas pequenas e bioterapêuticos, estudos de imunogenicidade, desenvolvimento de vacinas e QC.

Esses processos biológicos geralmente são estudados usando duas técnicas calorimétricas: Calorimetria de titulação isotérmica (ITC) e Calorimetria de varredura diferencial (DSC).

A microcalorimetria não requer identificação e o desenvolvimento de análise mínima, é conveniente, rápida e adequada para soluções turvas e coloridas.

  • A Calorimetria de titulação isotérmica (ITC) pode quantificar a afinidade de ligação (KD), a estequiometria de ligação (n), entalpia (ΔH) e entropia (ΔS) em um único experimento e permite a elucidação do mecanismo de ligação e determinação da cinética de enzimas. Os dados podem ser usados para avaliar a atividade-alvo, a validação de hits e a otimização de chumbo.
  • A Calorimetria de varredura diferencial (DSC) avalia a estabilidade térmica (Tm) e soluciona problemas como se a proteína está adequadamente dobrada, homogênea e termicamente estável. Essas informações vitais podem ser usadas para avaliar, por exemplo, a capacidade de fabricação e a formulação ideal.