Epigallocatechin-Gallat (EGCG) ist der wichtigste Polyphenol-Inhaltsstoff von grünem Tee. Diese Verbindung ist ein starkes Antioxidationsmittel und oxidiert leicht. Zahlreiche Studien haben seine positiven Auswirkungen auf die menschliche Gesundheit gezeigt, zum Beispiel seine krebs- und entzündungshemmende Wirkung. Im Körper wird EGCG durch Serumalbumin transportiert. EGCG oxidiert leicht, und die Wechselwirkungen der oxidierten Form weisen vermutlich signifikante Unterschiede auf. Allerdings wird das Vorhandensein von oxidiertem EGCG in der Literatur in der Regel vernachlässigt, und seine Auswirkungen wurden nicht im Detail untersucht.
Wir haben hier die markerfreie Quantifizierung mit Zweikanalmessung angewendet. Das gemessene kinetische Signal kann zu jedem Messzeitpunkt mit einem Signal eines Referenzkanals kompensiert werden. Durch Tests sowohl hydrophiler als auch hydrophober Plattformen haben wir festgestellt, dass EGCG an eine Vielzahl von Oberflächen binden kann. Unter Ausnutzung der Zweikanal-Referenzierbarkeit sowie der besonderen Empfindlichkeit und des Durchsatzes der verwendeten markerfreien Technik wurden in den Experimenten die spezifischen Wechselwirkungen zwischen Rinderserumalbumin (BSA) und EGCG aufgezeigt. Außerdem wurde die charakteristische Dissoziationskonstante (Kd) des Bindungsgleichgewichts bestimmt.
Epigallocatechin-Gallat (EGCG) ist der wichtigste Polyphenol-Inhaltsstoff von grünem Tee. Diese Verbindung ist ein starkes Antioxidationsmittel und oxidiert leicht. Zahlreiche Studien haben seine positiven Auswirkungen auf die menschliche Gesundheit gezeigt, zum Beispiel seine krebs- und entzündungshemmende Wirkung. Im Körper wird EGCG durch Serumalbumin transportiert. EGCG oxidiert leicht, und die Wechselwirkungen der oxidierten Form weisen vermutlich signifikante Unterschiede auf. Allerdings wird das Vorhandensein von oxidiertem EGCG in der Literatur in der Regel vernachlässigt, und seine Auswirkungen wurden nicht im Detail untersucht.
Wir haben hier die markerfreie Quantifizierung mit Zweikanalmessung angewendet. Das gemessene kinetische Signal kann zu jedem Messzeitpunkt mit einem Signal eines Referenzkanals kompensiert werden. Durch Tests sowohl hydrophiler als auch hydrophober Plattformen haben wir festgestellt, dass EGCG an eine Vielzahl von Oberflächen binden kann. Unter Ausnutzung der Zweikanal-Referenzierbarkeit sowie der besonderen Empfindlichkeit und des Durchsatzes der verwendeten markerfreien Technik wurden in den Experimenten die spezifischen Wechselwirkungen zwischen Rinderserumalbumin (BSA) und EGCG aufgezeigt. Außerdem wurde die charakteristische Dissoziationskonstante (Kd) des Bindungsgleichgewichts bestimmt.
Die ermittelten Bindungskonstanten wurden mit Literaturwerten verglichen und ergaben eine hinreichende Übereinstimmung mit den NMR-Daten. Neben dem nativen EGCG wurde auch die oxidierte Form von EGCG untersucht, deren Bindungsverhalten zu Serumalbuminen noch nie untersucht worden ist. Es wurde eine überstöchiometrische Bindung festgestellt. BSA hat stärkere und schwächere Bindungsstellen, die durch zwei separate Kd-Werte charakterisiert werden können. Darüber hinaus erhöhte die EGCG-Oxidation die gebundene Menge.
