Guía del peso molecular – con el Zetasizer

¿Mediciones de peso molecular con el software Zetasizer?

Primero, unas palabras de precaución: las mediciones de peso molecular o Mw en general no son fáciles, requieren tiempo, buenas habilidades de preparación de muestra, así como paciencia. Si eres nuevo en el Zetasizer de Malvern, puede ser mejor familiarizarse primero con la técnica de dispersión de luz dinámica (DLS), rápida, fácil de usar y bastante indulgente. {{Si eres experimentado y quieres explorar en profundidad el Zetasizer, adelante con Una evolución en la tecnología de dispersión de luz}}.

Bien, con eso aclarado, el software puede manejar dispersión de luz estática con el método relativamente simple de serie de concentraciones. Todo lo que se necesita es

• un estándar de dispersión (que usualmente es por defecto el Tolueno)
• el dispersante o solvente (donde se dispersa el material de la muestra)
• una serie de concentraciones en el dispersante (5 o más diferentes serían un buen número)

Recomendamos cuvetas de vidrio o cuarzo de calidad, para evitar cualquier desviación debido a rayaduras, variaciones en el grosor de las paredes, imperfecciones de fabricación que puedan alterar la intensidad absoluta de dispersión.

El calculador de concentración en el software (descarga gratuita) puede proporcionar guía sobre un rango de concentración adecuado para mediciones de peso molecular. Esto se puede acceder desde Herramientas – Calculadoras – Utilidades de Concentración. Por ejemplo, con una muestra de peso molecular esperado de 75,000, un rango de concentraciones entre 0.2 a 2.0 g/L sería adecuado. (Esta es solo una recomendación de guía estimada, algo fuera de ese rango debería funcionar también).

Para la configuración de un SOP (procedimiento estándar de operación o método de medición), la mayoría de las configuraciones del ‘Tipo de Medición de Peso Molecular’ son autoexplicativas. Es altamente recomendado también realizar mediciones de tamaño y comprobar la configuración para guardar resultados parciales (es decir, funciones de correlación inadecuadas) de todos modos.

Con las mediciones de tamaño realizadas durante el método de medición de peso molecular, será mucho más fácil ayudar a solucionar cualquier resultado inesperado.

¿Por qué el peso molecular está totalmente incorrecto?

Varias razones potenciales pueden combinarse para llevar a un resultado inesperado.

1. Preparación de la muestra. La intensidad dispersa es la suma de todas las contribuciones en la muestra lo que lleva a un peso molecular promedio. Y agregados, polvo, escombros, todo contribuye a ese promedio. A menudo, la filtración, centrifugación o cromatografía pueden ser útiles para «limpiar» la muestra. Realizar mediciones de tamaño DLS para confirmar.
2. Dispersante no limpio. Similar al primer punto, específicamente si la medición del dispersante o solvente está desviada, esto influirá en el resultado general.
3. Estándar de dispersión inadecuado. El tolueno puede degradarse, puede necesitar filtración, evitar el contacto con agua ya que puede llevar a micelas, la cuveta podría no estar limpia. Una tasa de conteo objetivo para el tolueno debería ser 150-350 kcps en un Zetasizer Nano ZS (400-700 kcps en un ZSP). Realizar medición DLS para confirmar la ausencia de partículas.
4. Valor dn/dc incorrecto. Es parte de la ecuación e ingresa con su cuadrado, 20% de error en dn/dc significa 40% de error en el peso molecular.
5. Valores de concentración de muestra incorrectos. Material de muestra no completamente disuelto, material perdido en la filtración.

Si ninguno de esos es un problema, envíanos los datos.

¡Para mediciones de peso molecular rutinarias usa GPC!

La dispersión de luz estática puede ser engorrosa. Si esta información es necesaria rutinariamente, puede ser mejor considerar la dispersión de luz en conjunto con una técnica de separación (a menudo conocida bajo el acrónimo SEC-MALS) como cromatografía (por ejemplo, un OMNISEC), donde la muestra siempre se «limpia» automáticamente debido al mecanismo de separación.

Esperamos que lo anterior pueda facilitar algunas mejoras en las mediciones de peso molecular en el Zetasizer para ti.

Un vídeo narrado del Zetasizer y su funcionalidad se puede encontrar aquí: Una evolución en la tecnología de dispersión de luz.

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