PEAQ-ITC

El sistema MicroCal PEAQ-ITC tiene una sensibilidad excepcional y es muy fácil de usar. El sistema mide directamente el calor que se libera o se absorbe durante los eventos de enlace bioquímico, del que se calcula la afinidad de enlace (K_D), la estequiometría (n), la entalpía (ΔH) y la entropía (ΔS). Con optimización del sistema y una mínima preparación de la muestra, se generan los datos de un modo rápido y sencillo. La amplia gama de afinidad permite el análisis de aglutinantes con afinidad leve o alta con una excepcional reproducibilidad. MicroCal ITC es una herramienta esencial para cualquier laboratorio de investigación que estudia las interacciones biomoleculares, donde la alta sensibilidad y resultados rápidos son de suma importancia.

• Los flujos de trabajo sencillos y guiados cuentan con videos de ayuda permiten a usuarios de todos los niveles generar datos de alta calidad.
• La alta señal al ruido le da más confianza para acceder a los datos de calidad y relevancia de los parámetros termodinámicos y de afinidad generada.
• El lavado automatizado con detergente de las celdas de muestra y de la jeringa de titulación lo ayudará a obtener datos reproducibles de alta calidad.
• Todos los parámetros de enlace (afinidad, estequiometría, entalpía y entropía) en un solo experimento.
• Rápido para dar los primeros resultados sin desarrollo de ensayo, libre de marcadores, sin inmovilización y sin limitaciones de peso molecular.
• Sensibilidad para investigar cualquier interacción biomolecular usando tan solo 10 μg de proteína.
• Mide directamente afinidades desde milimolares a nanomolares (K_DS) (10^-2 to 10^-9 M).
• Mide constantes de disociación de nanomolares a picomolares utilizando una técnica de enlace competitiva (10^-9 to 10^-12M).
• Hastelloy no reactivo para la resistencia y compatibilidad química con las muestras biológicas.
• Compatible con disolventes no acuosos.
• Actualizable al sistema MicroCal PEAQ-ITC totalmente automatizado.

Se puede investigar una amplia variedad de aplicaciones con MicroCal PEAQ-ITC, entre las que se incluyen caracterización de interacciones moleculares de moléculas pequeñas, proteínas, anticuerpos, ácidos nucleicos, lípidos y otras biomoléculas. También puede utilizarse para medir la cinética enzimática. 

El software de análisis MicroCal PEAQ-ITC permite realizar una simulación de diseño experimental, la evaluación en lote de grandes conjuntos de datos, la evaluación automatizada de la calidad de datos y cuenta con una interfaz de usuario simplificada que lo guía a las cifras finales y a la presentación de gráficos de calidad de un modo rápido y sencillo.

• Permite abrir varios experimentos en una sola sesión.
• Es compatible con muchos modelos de ajuste automático.
  • Disociación.
  • Cinética de la enzima - Múltiples inyecciones.
  • Cinética de la enzima - Una sola inyección.
  • Un conjunto de sitios.
  • Sitios de enlace secuenciales.
  • Un conjunto de sitios - SIM.
  • Dos conjuntos de sitios.
  • Competitivo.
• Evaluación automatizada de la calidad de los datos.
  • Buena calidad de los datos - con enlace.
  • Buena calidad de los datos - sin enlace.
  • Mala calidad de datos - Comprobar datos.

Los microcalorímetros de titulación isotérmica miden el cambio de calor que se produce cuando interactúan dos moléculas. El calor se libera o absorbe como resultado de la redistribución y formación de enlaces no covalentes cuando las moléculas que interactúan pasan de estado libre a enlazadas. El ITC supervisa estos cambios de calor mediante la medición del diferencial de potencia que se aplica a los calentadores de celdas, necesarios para mantener en cero la diferencia de temperatura entre la celda de referencia y la celda de muestra cuando se mezclan los componentes de enlace. La celda de referencia por lo general contiene agua, mientras que la celda de muestra contiene uno de los componentes de enlace (la muestra, a menudo, pero no necesariamente una macromolécula) y una jeringa de agitación que contiene el otro componente de enlace (el ligando). El ligando se inyecta en la celda de muestra, por lo general en pequeñas alícuotas de 0.5 a 2 μL, hasta que la concentración del ligando sea 2 o 3 veces mayor que la de la muestra. Cada inyección de ligando da como resultado un pulso de calor que se integra con respecto al tiempo y se normaliza para la concentración para generar una curva de titulación de kcal/mol en comparación con la relación molar (ligando/muestra). El isotermo resultante se ajusta a un modelo de enlace para generar afinidad (KD), estequiometría (n) y entalpía de interacción (ΔH).