Peso molecular absoluto y radio de formación de circunvoluciones
Un detector de dispersión de luz de ángulo múltiple (MALS, del inglés “multi angle light scattering”) es una forma de detector de dispersión de luz estática que permite que se mida el peso molecular absoluto (Mw, del inglés “molecular weight”) y el radio de formación de circunvoluciones (Rg, del inglés “radius of gyration”) de una muestra de forma potencial.
El método más común de utilizar una MALS es conectarlo a una cromatografía por exclusión de tamaño (SEC, del inglés “size exclusion chromatography”) HPLC o un sistema de cromatografía por permeación de gel (GPC, del inglés “gel permeation chromatography”), como OMNISEC. Como parte de este sistema, es fundamental que también se conecte un detector de concentración, de índice de refracción o de ultravioleta.
El detector SEC-MALS mide la luz dispersa mediante una muestra en muchos ángulos para que se cree un gráfico de Debye. El gráfico de Debye modela la dependencia angular de una dispersión de muestras y se utiliza para determinar el Mw y el Rg en cada porción de datos en el cromatograma.
Es importante tener en cuenta que se necesita considerar cuidadosamente tanto la orden ajuste como el modelo elegido para el análisis, dado que tendrán un impacto significativo en los resultados. Los dispersores isotrópicos, de menos de 10 a 15 nm de radio, dispersarán la luz de manera uniforme en todas las direcciones, por lo que solo se puede medir el Mw. Las muestras de dispersores anisotrópicos, de más de 10 a 15 nm de radio, dispersarán más luz hacia delante, lo que permite que se puedan medir el Mw y Rg.
Con el Rg, se puede generar un gráfico de conformación (gráfico de Rg en comparación con Mw) que permite medir cualquier diferencia estructural entre las muestras.
OMNISECEl sistema multidetector GPC/SEC más avanzado del mundo |
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| Tecnología | |
| Cromatografía por exclusión de tamaño (SEC) | |
| Cromatografía por permeación de gel | |
| SEC-MALS | |
| Tipo de medición | |
| Estructura molecular | |
| Tamaño molecular | |
| Peso molecular |
