Conseils pour le nettoyage des cellules DSC

Le principe de base du nettoyage des cellules est similaire à celui de l’ITC. Le choix du liquide de nettoyage, la fréquence du nettoyage et la température du trempage déterminent l’efficacité du nettoyage.

Les applications utilisant des macromolécules biologiques comme les protéines sont nombreuses, et le choix du liquide de nettoyage se fait souvent en fonction de la manière de décomposer les protéines.

Voici des méthodes spécifiques de nettoyage.

＜Précautions avant manipulation＞

・Le liquide de nettoyage est soit fortement alcalin soit toxique. Veuillez toujours porter un équipement de protection approprié lors de la manipulation.

・Un long trempage peut entraîner des risques de fixation, de précipitation ou de salissure dus à un oubli de rinçage.

・Dans le pire des cas, il y a un risque de causer des dommages irréversibles aux cellules. Veuillez procéder à vos propres risques.

・En fonction de l’état de salissure, effectuez le changement de liquide dans la limite d’une heure maximum. Ne laissez jamais tremper toute la nuit.

＜Matériel utilisé＞

・Liquide de nettoyage

・Seringues à gaz serré (VP-Capillary DSC Manual, pour ceux utilisant VP-DSC)

・Micropipette fournie (pour ceux utilisant PEAQ-DSC Manual)

・Dispositif de nettoyage (pour ceux utilisant VP-Capillary DSC Manual, VP-DSC；outil de nettoyage avec ThermoVac fourni, permettant l’injection de liquide dans les cellules échantillon)

・Outil de nettoyage (fourni avec le PEAQ-DSC Manual)

・ThermoVac ou aspirateur

＜À propos des liquides de nettoyage et conditions＞

・Solution aqueuse de DECON90 à 14% (efficace contre les protéines et autres contaminants, liquide de nettoyage recommandé pour l’entretien régulier. Température maximale de trempage de 60℃, ne pas dépasser 1 heure)

・Solution de nettoyage (mélange de solutions de hypochlorite de sodium et de hydroxyde de sodium, particulièrement haute capacité de dissolution des protéines, capable d’éliminer les salissures adhérées fermement aux cellules)

　　＜Préparation de la solution de nettoyage＞

　　　※Veuillez porter des gants et des lunettes de protection.

　　　1）Dissoudre 5 grammes d’hydroxyde de sodium dans environ 25 mL d’eau ultrapure.

　　　2）Ajouter 50 mL de solution d’hypochlorite de sodium (10-15% chlore) à 1).

　　　3）Compléter à 100 mL avec de l’eau ultrapure et bien mélanger.

　　＜Méthode de stockage de la solution de nettoyage＞

　　　La solution de nettoyage est efficace pendant au moins 1 an si conservée dans un récipient hermétique à l’abri de la lumière.

　　　En cas de précipitation, veuillez jeter la solution même si elle est encore dans sa durée de validité et en préparez une nouvelle.

・1% Zymit (liquide de nettoyage contenant des enzymes dégradantes de protéines. Achetez le concentré et diluez-le selon les instructions du fabricant. Température maximale de trempage de 25℃ ne pas dépasser 12 heures)

＜Procédures de nettoyage＞

1）Installez le plug sur le capteur de pression

2）Retirez l’eau ultrapure des cellules Sample/Reference

3）Remplissez les deux cellules avec le liquide de nettoyage en utilisant une seringue à gaz serré ou une micropipette (procédez de la même manière que lors du remplissage des cellules avec des échantillons)

4）Videz une fois le liquide de nettoyage des deux cellules

5）Remplissez à nouveau les deux cellules avec le liquide de nettoyage (éliminez autant que possible le liquide de nettoyage excédentaire. Procédez de la même manière que lors du remplissage d’échantillons)

6）Ajustez la température des cellules à la température cible

7）Couvrez les ports cellulaires avec un essuie-tout ou autre pour éviter l’entrée de poussière

8）En fonction de l’étendue de la salissure, effectuez le trempage pendant environ 10 minutes à une heure maximum

9）Après le trempage, ramenez la température des cellules à 25℃ (attention : introduire une seringue à gaz serré alors que le liquide de nettoyage est chaud peut endommager la seringue ou entraîner une éjection du contenu des cellules)

10）Utilisez une seringue à gaz serré pour extraire avec précaution le liquide de nettoyage revenu à température ambiante, puis rincez immédiatement abondamment la seringue avec de l’eau ultrapure

11）Utilisez une seringue à gaz serré pour injecter de l’eau ultrapure dans les deux cellules et effectuez un pompage lent. Refaire plusieurs fois le mouvement de haut en bas pour rincer toute la cellule

12）Rincez chaque cellule Sample/Reference avec un total d’environ 50-100 mL d’eau ultrapure ; pour la cellule échantillon, le nettoyage à l’aide du Cleaning Device est pratique

13）Si le liquide de nettoyage s’est déposé sur les ports cellulaires, essuyez-les avec un chiffon de laboratoire imbibé d’eau ultrapure

14）Lorsque vous insérez l’aiguille de la seringue à gaz serré dans la cellule, veuillez le faire lentement. Enfoncer brutalement le métal de l’aiguille contre le fond de la cellule peut causer des rayures sur la surface de la cellule, entraînant du bruit ou, dans le pire des cas, une panne. Veuillez ne pas injecter jusqu’à ce que le port cellulaire déborde pendant le rinçage.

15）Une fois le rinçage terminé, remplissez les deux cellules avec de l’eau ultrapure

＜Précautions lors des opérations de nettoyage＞

・Veuillez rincer les deux cellules avec suffisamment d’eau ultrapure. L’utilisation du ThermoVac/Dispositif de nettoyage est également efficace.