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WAVEsystem: KYMAchip storage and reuse guide
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La puce KYMAchip, la nouvelle génération de puces capteurs pour le système WAVEsystem, offre toujours une grande compatibilité avec les échantillons grâce à une conception anti-obstruction, tout en proposant désormais des canaux plus précisément définis pour garantir une cohérence optimale des données.
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Nos cartouches microfluidiques sont depuis des années au cœur de l'analyse par interférométrie à couplage de réseau biophysique (GCI) sur le système WAVEsystem, pour des applications allant des particules de grande taille aux échantillons bruts et aux protéines membranaires. La puce KYMAchip, puce WAVEchip de nouvelle génération, génère les mêmes données cinétiques de haute qualité que son prédécesseur, avec un temps de montée réduit. Les transitions de signal sont encore plus nettes qu'auparavant, permettant des mesures de liaison plus précises. Sa nouvelle conception de canal réduit les variations entre les canaux et permet d'obtenir plus rapidement des résultats d'analyse cinétique plus fiables.
La puce KYMAchip peut être conservée et utilisée à plusieurs reprises. Profitez des avantages de la nouvelle puce KYMAchip sans compromettre la qualité des données ni modifier vos flux de travail existants.
Les canaux repensés permettent de passer rapidement d'un tampon à un échantillon, pour des transitions de signal rapides qui permettent de réaliser des mesures précises des taux de dissociation les plus rapides (jusqu'à 10 s⁻¹) et des interactions complexes.
La robustesse accrue de la puce KYMAchip lui permet d'être stockée et réutilisée, tout en garantissant le bon fonctionnement de sa microfluidique anti-obstruction, adaptée à une large gamme d'applications, des petites molécules aux protéines membranaires.
Une architecture de canaux précisément définie réduit les variations entre les canaux, ce qui permet d'obtenir des données plus reproductibles.
Les cellules à flux parallèle et les canaux repensés de la puce KYMAchip optimisent davantage le passage du tampon à l'échantillon, permettant des transitions d'échantillons encore plus rapides et améliorant ainsi la résolution temporelle des événements d'association et de dissociation rapides. Cela permet d'obtenir des sensorgrammes plus clairs et des analyses cinétiques plus fiables pour les interactions à faible affinité.
Définis avec précision, les canaux de la puce KYMAchip réduisent les variations entre les canaux et offrent ainsi les avantages suivants :
Cela améliore la reproductibilité entre les répétitions, garantissant ainsi des paramètres cinétiques cohérents et simplifiant l'analyse des données.
La cohérence de la puce KYMAchip renforce la sensibilité exceptionnelle de la plateforme WAVEsystem, qui permet d'analyser la cinétique de signaux inférieurs à 1 pg/mm² (1 RU), avec un niveau de bruit inférieur à 0,01 pg/mm² et une dérive de la ligne de base inférieure à 0,3 pg/mm²/min, même pour des rapports de masse moléculaire ligand-analyte allant jusqu'à 1 000:1.
Grâce à la conception fluidique innovante de la puce KYMAchip, l'ensemble de la microfluidique est directement intégrée dans la puce, plutôt que dans le système WAVEsystem lui-même. Les valves standard de gros calibre sont placées en aval de l'instrument, plutôt que d'utiliser des microvalves à proximité de la puce.
Le système WAVEsystem offre une robustesse des échantillons bruts, généralement atteinte uniquement avec des tests réalisés sur plaque.
La puce KYMAchip est compatible avec une large gamme de types d'échantillons, notamment les suivants :
La cartouche résistante aux produits chimiques est compatible avec des solvants agressifs, ce qui permet l'utilisation de fortes concentrations de DMSO, d'acétonitrile et d'autres solvants organiques couramment utilisés dans les bibliothèques de fragments, ainsi que de détergents visqueux. Cela permet d'explorer les conditions de solubilisation et de purification des protéines membranaires, ainsi que de caractériser avec fiabilité et confiance des cibles particulièrement complexes.
La puce KYMAchip, plus robuste que la WAVEchip, peut être retirée du système WAVEsystem et réinsérée par la suite, ce qui permet de la stocker et de la réutiliser.
Les étapes chronophages de purification et les problèmes d'obstruction entraînent souvent l'arrêt d'autres systèmes.
À l'inverse, la technologie microfluidique anti-obstruction de la puce KYMAchip permet de traiter des échantillons bruts et complexes sans nécessiter de travail supplémentaire de la part des opérateurs, tout en fournissant des données rapides et de haute qualité avec une résolution supérieure en termes de signal et de temps.
| Capteur WAVEchip | Matrice de surface de capteurs | Modalité d'immobilisation | Applications suggérées |
|---|---|---|---|
| PCP | Hydrogel PC quasi-plan | Couplage à l'amine | Ligands et/ou analytes de grande taille, tels que les liposomes protéiques ou lipidiques, les virus et les VLP |
| PCP-STA | Streptavidine pré-immobilisée
Hydrogel PC quasi-plan | Biotine | Ligands biotinylés de grande taille, analytes tels que des liposomes, des virus ou des VLP |
| PCP-RST | Surface de streptavidine régénérable
Hydrogel PC quasi-plan | Biotine | Ligands biotinylés de grande taille, criblage de ligands |
| PCP-PAG | Protéine de fusion A/G pré-immobilisée
Hydrogel PC quasi-plan | IgG | Pour capturer une large gamme d'IgG et de protéines marquées par un fragment Fc |
| PCP-NTA | NTA pré-immobilisée
Hydrogel PC quasi-plan | Étiquette His | Ligands de grande taille avec étiquette His, analytes tels que des liposomes, des virus ou des VLP |
| PCP-LIP | Groupes lipophiles pré-immobilisés
Hydrogel PC quasi-plan | Lipides | Ligands hydrophobes de grande taille, tels que les liposomes et les vésicules membranaires |
| PCZ | Hydrogel PC quasi-plan, fonctionnalisé avec un polymère zwitterionique contenant des acides carboxyliques et des amines tertiaires en densités similaires | Couplage à l'amine | Faible tendance à l'encrassement, idéal pour le couplage de protéines à faible point isoélectrique ou de ligands polyanioniques |
| PCL | Hydrogel PC épais à faible capacité, avec une quantité réduite de charges négatives (environ 25 %) | Couplage à l'amine | Matrices complexes telles que le sérum ou le surnageant de culture. Nécessite du sulfo-NHS pour son activation |
| PCH | Hydrogel PC épais | Couplage à l'amine | Grand rapport de masse moléculaire entre le ligand et l'analyte, à usage général |
| PCH-NTA | NTA pré-immobilisée
Hydrogel PC épais | Étiquette His | Ligands avec étiquette His, à usage général |
| PCH-STA | Streptavidine pré-immobilisée
Hydrogel épais | Biotine | Ligands biotinylés, à usage général |
| PCH-RST | Surface de streptavidine régénérable
Hydrogel épais | Biotine | Ligands biotinylés, criblage de ligands |
| DXP | Hydrogel DX quasi-plan | Couplage à l'amine | Ligands et/ou analytes de grande taille, tels que les liposomes protéiques ou lipidiques, les virus et les VLP |
| DXH-STA | Streptavidine pré-immobilisée
Hydrogel DX épais | Biotine | Ligands biotinylés, à usage général |
| DXH | Hydrogel DX épais | Couplage à l'amine | Grand rapport de masse moléculaire entre le ligand et l'analyte, à usage général |
| PC- = polycarboxylate, DX- = carboxyméthyldextran.
Capteurs revêtus de DX disponibles sur demande | |||
WAVEsystem: KYMAchip storage and reuse guide
Les puces KYMAchip et les puces WAVEchip d'origine offrent toutes deux les avantages suivants :
La nouvelle puce KYMAchip offre les avantages suivants :
Les puces KYMAchip sont compatibles avec une large gamme d'échantillons, notamment :
Cela dépend du type de puce, de la méthode d'immobilisation et du comportement du ligand. Les ligands avec une étiquette His sur des surfaces Ni-NTA, ainsi que les ligands fixés sur des surfaces de protéine A/G, peuvent être régénérés et réutilisés plusieurs fois. Les canaux repensés de la puce KYMAchip la rendent plus robuste, ce qui permet de la retirer, de la stocker et de la réinsérer pour une utilisation ultérieure.
La capacité d'immobilisation dépend du type de puce et de la méthode d'immobilisation. La puce 4PCH WAVEchip, la puce de capacité la plus élevée du portefeuille WAVEsystem, peut immobiliser jusqu'à 35 000 pg/mm2 de BSA, mais la capacité expérimentale dépend du ligand utilisé.
Le logiciel WAVEcontrol est doté d'un simulateur intégré qui permet de déterminer la densité de ligand requise pour une réponse théorique acceptable.
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La nouvelle génération de puces KYMAchip s'appuie sur les performances éprouvées de la puce WAVEchip, offrant des transitions de signal plus nettes, une meilleure cohérence et la possibilité de la stocker et de la réutiliser