FAQ: 如何利用動態光散射(DLS)估算分子量?

這是一個我最近遇到的問題,我認為可能值得在這裡分享:

「我想使用粒徑數據來計算一個估算的分子量。您能否提供一些相關信息。例如,我應該使用按數量、按體積或按強度的平均尺寸?」

如果您希望使用尺寸數據來預測/估算分子量,我建議使用來自強度分布的尺寸。然而,如果您有一個寬峰,使用體積分布也能提供有用的見解。通常,如果有多種不同物種的分布,從體積分布估算的分子量會讓您了解最小部分的分布。例如,對於蛋白質,如果存在單體-二聚體平衡,從強度估算的分子量會給出介於兩者之間的平均分子量,然而當使用體積估算時,這將非常接近單體的分子量。

Zetasizer 軟件中分子量估算器的截圖

您可以將這些數據輸入 Zetasizer 軟件中的分子量估算器,路徑為工具 → 計算器 → MW & 形狀估算標籤,以獲得分子量,例如為 8nm 的半徑。在截圖中,顯示的是 8nm 半徑的計算器。此處,對於類似於線性多糖的分子,其分子量估算為 88kDa。如果預期分子更像是支鏈多糖,則 8nm 對應於估算的 207kDa。這是一個估算,通常這個估算的精確度在約 20% 之內,然而對於其他分子形狀可能存在較大的偏差。

技術說明文件「Zetasizer 軟件中計算器介紹」顯示了各種可用的計算器的背景和參考文獻,軟件中的信息摘要也可以在題為「FAQ DLS 可以測量分子量嗎?」的摘要中找到。

計算器中分子量(或更正確地說:摩爾質量)的單位是千道爾頓 [kDa],這等同於 kg/mol。1 kDa 相當於 1000 Da 或 1000 g/mol。

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