Guide to molecular weight – with the Zetasizer

使用 Zetasizer 軟體進行分子量測量?

透過 SLS 測量的分子量 - 圖像由 Ulf Nobbmann 創建首先一些警告:一般而言,分子量或 Mw 測量並不容易,需要時間、良好的樣品準備技巧以及耐心。如果您是 Malvern Zetasizer 的新手,最好的方法可能是先熟悉動態光散射(DLS)這種快速、用戶友好且相當寬容的技術。如果您有經驗並想深入研究 Zetasizer,請繼續查看光散射技術的演變

好了,說到這裡,該軟體可以通過相對簡單的濃度系列方法來處理靜態光散射。所需的只是

  • 一個散射標準(通常設置為甲苯)
  • 分散劑或溶劑(樣品物質在其中分散)
  • 分散劑中的一系列濃度(5個或更多不同濃度是一個不錯的數量)

我們建議使用優質的玻璃石英比色皿,以避免因刮痕、壁厚變化、生產缺陷而造成的絕對散射強度的偏差。

軟體中的濃度計算器(免費下載)可以提供適當的分子量測量的濃度範圍指導。可以從工具 – 計算器 – SLS 濃度計算器(Ulf Nobbmann 的螢幕截圖)濃度公用程式中獲取。 例如,對於期望分子量為 75,000 的樣品,濃度範圍在 0.2 到 2.0 g/L 之間就很適合。(這只是估計的指導建議,略微超出該範圍也應可行)。

在設定 SOP(標準操作程序或測量方法)時,大多數“測量類型分子量”的設置都是不言自明的。強烈建議也進行尺寸測量,並檢查以儲存部分結果(即不合適的相關函數)的設置。

如何設置包括 DLS 的分子量測量(Ulf Nobbmann 提供)

在分子量測量方法中進行尺寸測量後,更容易協助排除任何意外結果的故障。

為什麼分子量完全不對?

幾個潛在原因可能會結合導致預料之外的結果。

  1. 樣品準備。散射強度是樣品中所有貢獻的總和,從而導致平均分子量。聚集體、灰塵、碎屑都會對該平均值有貢獻。通常,過濾、離心或色譜法可能有助於“清理”樣品。進行 DLS 尺寸測量以確認。
  2. 分散劑不乾淨。類似於第一點,特別是如果分散劑或溶劑的測量不正確,這將影響整體結果。
  3. 不合適的散射標準。甲苯可能會降解,可能需要過濾,避免與水接觸,因為這可能會導致形成膠束,比色皿可能不乾淨。甲苯的目標計數應在 Zetasizer Nano ZS 中達到 150-350 kcps(ZSP 中為 400-700 kcps)。進行 DLS 測量以確認沒有顆粒。
  4. 不正確的dn/dc 值。它是方程的一部分,並以其平方進入,dn/dc 偏差 20% 意味著分子量偏差 40%。
  5. 樣品濃度值不正確。樣品物質未完全溶解,材料在過濾過程中丟失

如果這些都不是問題,請向我們發送數據

對於例行分子量測量,請使用 GPC!

靜態光散射可能會很麻煩。如果經常需要這些資訊,可能更適合考慮與分離技術(通常被稱為 SEC-MALS)結合使用光散射,例如色譜法(如使用OMNISEC),通過分離機制,樣品總是會自動“清理”。

希望上面的資訊能幫助您在 Zetasizer 上改善分子量測量。

可以在這裡找到 Zetasizer 和功能的講述視頻:光散射技術的演變

之前

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