DSC細胞清潔技巧

基本的細胞清潔的概念與ITC相同。選擇清潔液、清潔頻率、浸泡清洗的溫度，決定了清潔效果。

由於應用中大量使用蛋白質等生物大分子，因此，多數情況下從如何分解蛋白質的角度來選擇清潔液。

以下是具體的清潔方法。

＜操作前的注意事項＞

・清潔液是強鹼性或有害的物質。在操作時，請務必戴好適當的防護裝備進行。

・長時間浸泡清洗有可能因忘記沖洗而導致溶液幹固、沉澱、污垢附著等風險。

・在最壞的情況下，可能會對細胞造成不可逆的損傷。執行操作時，請在自負責任的原則下進行。

・根據污垢的情況，請在不超過1小時的範圍內更換溶液。絕對不要長時間浸泡，包括過夜。

＜使用的物品＞

・清潔液

・氣密注射器（若使用VP-Capillary DSC Manual, VP-DSC）

・隨附的微型移液器（若使用PEAQ-DSC Manual）

・清潔裝置（若使用VP-Capillary DSC Manual, VP-DSC的客戶，裝置附帶之ThermoVac，可以將液體輸送到樣品細胞內的清潔工具）

・清潔工具（PEAQ-DSC Manual附帶的清潔工具）

・ThermoVac或吸氣器

＜使用的清潔液及條件＞

・14% DECON90水溶液（對蛋白質及其他污垢有效，日常維護推薦使用的清潔液。最大浸泡溫度60℃，不可超過1小時）

・清潔溶液（次氯酸鈉與氫氧化鈉的混合溶液，特別是溶解蛋白質的能力較高，可以去除強附著於細胞的污垢）

　　＜清潔溶液的調整＞

　　　※請戴上手套及護目鏡。

　　　１）將5克氫氧化鈉溶解於約25 mL的超純水中。

　　　２）將50 mL的次氯酸鈉溶液（10-15％氯）添加到１）中。

　　　３）用超純水稀釋至100 mL，充分混合。

　　＜清潔溶液的儲存方法＞

　　　清潔溶液應存儲於密封容器中，在暗處儲存，至少有效1年。

　　　如果觀察到沉澱物析出，即使在保質期內也應丟棄，並重新製備。

・1% Zymit（含有蛋白酶的清潔液。購買原液並稀釋至製造商指定濃度使用。最大浸泡溫度25℃，不可超過12小時）

＜清潔操作＞

１）將插頭安裝到壓力感測器上

２）從Sample/Reference兩個細胞中去除超純水

３）用氣密注射器或微型移液器將清潔液填充到兩個細胞中（與填充樣品到細胞中相同的方式進行）

４）當清潔液進入兩個細胞後，將其全部倒掉

５）再次填充清潔液到兩個細胞中（儘可能去除溢出的多餘清潔液。與樣品填充時相同的方式操作）

６）將細胞溫度設定到目標溫度

７）用紙巾等覆蓋細胞孔，以避免異物進入

８）根據污垢的程度浸泡10分鐘至最多1小時

９）浸泡結束後，將細胞溫度恢復至25℃ (注意: 當清潔液仍然溫暖時若插入氣密注射器，注射器可能會損壞，或細胞中的物質可能會飛濺出來)

１０）用氣密注射器小心抽出已回到室溫的清潔液，然後立即用足夠的超純水沖洗氣密注射器

１１）用氣密注射器將超純水注入兩個細胞，慢慢運動活塞。上下多次操作，沖洗整個細胞

１２）必須至少沖洗Sample/Reference的每一個，總量50-100 mL左右超純水，對於Sample細胞，使用清潔裝置清洗很方便

１３）如果洗液附著於細胞孔部，請用含有超純水的實驗室用紙擦拭

１４）請慢慢地將氣密注射器的針頭部分插入細胞。若用針頭的金屬部分猛烈撞擊細胞底部，可能會在細胞表面留下刮痕，造成噪音，甚至最壞可能造成故障。沖洗時注入的量以不溢出細胞孔為限。

１５）沖洗完成後，請將超純水填滿兩個細胞

＜清潔操作時的注意事項＞

・請充分沖洗兩個細胞，ThermoVac/Cleaning Device的使用也會有效。