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蛋白質分子量測定： 

SEC-MALS 與傳統校準

溶液中蛋白質的物理特性和行為隨著蛋白質純度和配方相關的各種因素以及其自身的固有特性而變化。

體積排除色譜法（SEC）是一種強大的工具，用於研究蛋白質的重組、分子量和聚集等因素。 

SEC 的原理涉及樣品通過具有滲透性和惰性的色譜柱填料基質進行分離。小分子更深地穿過孔洞，而大分子被排除，因此大分子更快地穿過色譜柱。  這結果基於流體動力體積的分離，但最終目標通常是確定分子量。

 以前，推測分子量是通過比較未知蛋白質的洗脫時間與已知分子量的標準球形蛋白質來估算分子量，這稱為 “傳統校準（Conventional Calibration）”。這種方法使用了紫外（UV）等單一濃度檢測器進行。  

< Malvern Viscotek SEC-MALS 20 系統 > 

但是 現在可以將光散射檢測器與濃度檢測器（UV 或折射率，RI）結合使用，以不受停留時間影響地測量蛋白質分子量。  由於大多數蛋白質不是球形結構，因此測得的分子量不准確，這是一項非常有用的技術。  增加第二個濃度檢測器、IV（固有粘度）、DLS（動態光散射）等檢測器後，可以顯著增加單次 SEC 測量中提供的信息量。

Malvern Viscotek SEC-MALS 20 系統是一種光散射設備，擁有能夠測量不受洗脫體積影響的蛋白質分子量的 20 個檢測角。  此應用說明將引導您了解使用 SEC 分離各種蛋白質的過程。 

此外， 我們將使用 MALS（多角度光散射）或傳統校準進行分子量的測量，並討論其結果之間的差異。