折射率增量 dn/dc 值
當你需要的時候,折射率增量 dn/dc 值
在光散射中,一個與雷利比 RΘ 一同出現的重要參數是折射率增量,也稱為“dn/dc”。通常,將 Kc/RΘ 繪製為濃度的函數以外推至零濃度。這就是我們在批量 SLS(靜態光散射)測量中獲得分子量的方法。係數 K 包括
其中n是溶劑的折射率,λ 是激光的波長,NA 是阿伏伽德羅常數。此處,折射率增量適用於特定條件下的樣品。因此,溫度、激光波長、分子的構型或添加劑會對 dn/dc 的絕對值產生影響。因此,為了完美的靜態光散射實驗,應確定所考慮條件下的確切 dn/dc 值。
在許多實際例子中,dn/dc 的值可以從在相似條件下獲得的先前數據集中(或來自文獻參考)獲得。由於折射率直觀地與分子的密度/特定體積相關(對於某些蛋白質而言,這相當相似),因此 0.185 mL/g 作為“平均蛋白質”的 dn/dc 是一個受歡迎的選擇。巧合的是,GPC 的一個最受歡迎的標準是四氫呋喃 THF 中的聚苯乙烯,這同樣擁有 0.185 mL/g 的 dn/dc。
一些常見 dn/dc 值的表格
下表顯示了在室溫 [25C] 下使用紅色激光器 [氦氖,632.8nm] 進行光散射配置的折射率增量值。對於一系列常見樣品,列出了折射增量值。
樣品/固體相 | 溶劑/液體相 | dn/dc [mL/g] |
---|---|---|
生物分子 | 水溶液緩衝液 | 平均值:0.185 |
蛋白質 | 水溶液緩衝液 | 0.16-0.20,平均值:0.185 |
DNA | 水溶液緩衝液 | 0.17 |
RNA | 水溶液緩衝液 | 0.17-0.19 |
丙氨酸 | 水溶液緩衝液 | 0.19 |
多醣類 | 水溶液緩衝液 | 平均值:0.15 |
幾丁質 | 水溶液緩衝液 | 0.16-0.18 |
右旋糖酐 | 水溶液緩衝液 | 0.14-0.15 |
透明質酸 | 水溶液緩衝液 | 0.16-0.18 |
普魯蘭 | 水溶液緩衝液 | 0.14-0.16 |
澱粉 | 水溶液緩衝液 | 0.15 |
葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖 | 水溶液緩衝液 | 0.14-0.15 |
脂質體 | ||
磷脂 | 水 | 0.16 |
SDS 微胞 | 水 | 0.11 |
CTAB 微胞 | 水 | 0.15 |
聚合物 | ||
聚苯乙烯 PS | THF | 0.18-0.19 |
聚苯乙烯 PS | 甲苯 | 0.08-0.11 |
聚苯乙烯 PS | 環己烷 | 0.16-0.17 |
聚苯乙烯 PS | 癸烯 | 0.12 |
聚苯乙烯 PS | MEK | 0.21 |
聚苯乙烯 PS | TCB | 0.052 |
PMMA | DMF | 0.057 |
PMMA | THF | 0.09 |
PMMA | 甲苯 | 0.01-0.02 |
PVC | 環己酮 | 0.08 |
PVC | DMF | 0.08 |
PVC | THF | 0.10 |
PVP | 水 | 0.17 |
PEG 4000, PEG 6000 | 水 | 0.13 |
DNA = 去氧核糖核酸;RNA = 核糖核酸;SDS = 十二烷基硫酸鈉;CTAB = 橙黃三甲基氨溴化銨;PMMA = 聚甲基丙烯酸甲酯;PVC = 聚氯乙烯;PEG = 聚乙二醇;PVP = 聚乙烯吡咯酮;THF = 四氫呋喃;MEK = 甲基乙基酮;TCB = 1,2,4-三氯苯;DMF = 二甲基甲酰胺
一個有助於提供大量特定 dn/dc 值的參考文獻是 Theisen, A.; Johann, C.; Deacon, M.P.; Harding, S.E. 在 2000 年由 Nottingham University Press,Nottingham UK 發行的“Refractive Increment Data-Book for Polymer and Biomolecular Scientists”。ISBN: 1-897676-29-8
表中的某些值來自: Tumolo, T.; Angnes, L.; Baptista, M.S. “利用表面等離子共振技術測定分子和大分子溶液的折射率增量 (dn/dc)”,《分析生物化學》 333 (2004), 273–279; DOI: 10.1016/j.ab.2004.06.010
另請注意: FAQ – 是否建議估算 SLS 的 dn/dc? 本文件討論了估算折射率增量的誤差,尤其是不同波長、添加劑、溫度或結構/分子密度對 dn/dc 以及隨後對 Mw 和 A2 影響的具體效果。
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