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免標記交互作用分析

免標記交互作用分析技術,無需使用人工探針或標記,可直接分析原態分子 (例如蛋白質)

傳統標記法往往需要先標記各種生物分析的組成成分才能進行檢測。許多傳統生物分析法會用固化配體捕捉溶液裡的目標分析物,然後用專門的檢測試劑分析兩種分子間的交互作用。酵素結合免疫吸附分析法 (ELISA) 或使用微球的流式細胞儀都是上述傳統生物分析法的範例。標記會改變生物分子的結構及/或功能,導致實驗結果出現偏差。在某些情況下,標記甚至會使欲檢測的生物分子完全失去活性。此外,標記成分與其他生物分析組成成分的非專一性結合會產生不必要的背景訊號。當處理複雜的樣品時 (例如細胞培養上清液、血清或血漿),這一點尤其容易造成困擾。 

有別於傳統標記法,免標記分子交互作用檢測是相當有吸引力的選擇。免標記技術 (亦稱為免標記檢測或免標記感測) 使用阻抗或光學生物感測器測量分析物與生物感測器表面的固化配體結合後發生的變化。這種方法能夠即時監測交互作用,無需人為調控各種分析組成成分。

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以下為免標記技術 (此處指的是創新的 Creoptix® GCI 技術) 與傳統生物分析技術的差異概述。

免標記交互作用分析有哪些優點?

免標記交互作用分析技術可直接分析原態分子。此種技術可在不使用人工探針或標記的情況下瞭解分子的交互作用,生成生物相關資料,所提供的資料更能反映這些分子的自然行為。運用此技術取得的知識相當穩定且關鍵,有助於建構對結構活性關係的良好理解、進行中央疾病研究並開發安全有效的藥物。

重要的是,免標記技術使研究人員能夠進行分析,而只能提供終點結果的傳統方法無法做到這一點。免標記監測提供的動態、即時交互作用分析可進行動力學分析與親和力分析,以及評估結合專一性。

免標記交互作用分析是否適合用於我的應用? 

由於常見的蛋白質溶液添加劑會干擾螢光標記檢測,一般而言,免標記分析對大多數的生物緩衝液都適用。免標記法相當令人嚮往,因為這些方法通常能與即時檢測相容。免標記技術對執行各種應用的研究人員都相當具有吸引力,例如:生物研究、生物治療和小分子藥物開發、免疫原性研究以及疫苗研發

現今已有好幾種可用於檢測生物分子交互作用的免標記法。包括光學生物感測器 (例如 GCI)、繞射、石英晶體微天平和微量熱法

Malvern Panalytical 提供哪些免標記交互作用解決方案? 

Malvern Panalytical 可提供 Creoptix®WAVE 和 WAVEdelta 生物感測器,以及 MicroCal PEAQ-ITCMicrocal PEAQ-DSC 微量熱量計——這些都是功能強大且成熟的免標記溶液分析儀器。 

Creoptix® 生物感測器運用 GCI 技術,可即時建立關鍵反應參數,例如即時生成生物分子交互作用的結合速率常數 (ka)、解離速率常數 (kd) 和平衡解離常數 (KD)。據此生成的資料富含各種資訊,有助於深入瞭解生物過程及分子內和分子間交互作用的驅動機制。這種免標記技術允許將原態配體固定在生物感測器表面。 

MicroCal PEAQ- ITC 可測量分子交互作用時釋放或吸收的熱變化,來檢測分子複合體的結合與解離。據此生成的資料富含各種資訊,有助於深入瞭解生物過程及分子內和分子間交互作用的驅動機制。  

Microcal PEAQ-DSC 可檢測大分子 (例如蛋白質或核酸) 展開或脂質體微胞解離時的熱變化。此技術常用於探討生物製劑的穩定條件,用於藥物篩選、探討蛋白質特性及疫苗開發。