特點與優勢
MicroCal PEAQ-ITC Automated 結合了 MicroCal PEAQ-ITC 系統高靈敏度的熱分析儀核心,以及量測過程無須額外人為操作的自動化功能,可滿足忙碌研究和藥物開發實驗室對於生產力的需求,這套系統可直接測量生物化學結合過程中釋放或吸收的熱量,並由此計算結合親和力 (KD)、化學計量 (n)、焓 (ΔH) 和熵 (ΔS),除了製備適當濃度的樣品和試劑外,只需最低程度的檢定開發,即可迅速獲得初步結果,軟體操作也相當簡單,其包含了最佳化自動指令碼,可穩定操作和量測各種樣品類型和條件。

特點和優點
- 人性化使用者介面可協助您輕鬆設定實驗參數。
- 單次實驗即可取得所有結合參數 (親和力、化學計量、焓和熵)
- 只需最低程度的檢定開發即可迅速獲得初步結果,無須進行標記、固定化,且沒有分子量限制
- 高訊雜比讓您對得到的數據品質,以及所產生之親和力與熱力學參數的相關性更有信心
- 從 sub-millimolar 到 picomolar 範圍間提供優良的解離常數 (10-2 至 10-12 M) 數據品質
- 硬幣形狀的測試槽可讓樣品混合最佳化
- 無反應性的赫史特合金 (Hastelloy) 提供化學耐受性及生物樣品相容性
- 高靈敏度,甚至可使用低至 10 µg 的蛋白質樣品研究任何生化交互作用
- 樣品置於可溫控的 96 孔槽盤。
- 全自動化系統,量測過程無須額外人為操作,可增強生產力

運作原理
等溫滴定微熱量計測量兩個分子交互作用時所發生的熱量變化。當相互作用的分子從自由態轉變為結合態時,由於非共價鍵的重新分佈和形成而釋放或吸收熱量。
ITC 透過測量應用於池加熱器的差分功率來監測這些熱量變化,以在混合結合伴侶時保持參考池和樣品池之間的溫差為零。
參考池通常含有水,而樣品池含有一種結合配偶體(樣本,通常但不一定是大分子)和裝有另一種結合配偶體(配體)的攪拌注射器。

將配體注射到樣品池中,通常以 0.5 至 2 μL 等分試樣,直到配體濃度比樣品高兩到三倍。
每次注射配體都會產生一個熱脈衝,該熱脈衝相對於時間積分並標準化濃度,以產生千卡/摩爾與摩爾比(配體/樣品)的滴定曲線。
將所得等溫線擬合到結合模型以產生親和力 (KD )、化學計量 (n) 和交互作用焓 (ΔH)。

分析軟體
MicroCal PEAQ-ITC Analysis 軟體提供實驗設計模擬、大型數據集的批量評估、數據品質自動化評估和流暢的使用者介面,可引導使用者迅速且輕鬆地獲得最終數據和具備簡報品質的圖表。
- 在單一工作階段中開啟多個實驗
- 支援多種自動化擬合模型
- 解離
- 酶動力學 - 多次注射
- 酶動力學 - 單次注射
- 單組結合位點
- 序列結合位點
- 單組結合位點 - 模擬
- 兩組結合位點
- 結合競爭性
- 自動化評估數據品質
- 數據品質良好 - 結合
- 數據品質良好 - 未結合
- 數據品質不佳 - 檢查數據。

Very good instrument, fast and easy to use."
Clarissa Melo Czekster — University of St Andrews