Visão geral
O PEAQ-DSC Automatizado, uma tecnologia MicroCal, de alto rendimento e alta sensibilidade apresenta um software que simplifica o fluxo de trabalho por meio da configuração de experimento simplificado e da programação de instrumentos flexíveis.
A análise de dados automatizada permite a geração de dados de estabilidade térmica de alta integridade e oferece conformidade com as normas regulamentares, permitindo simultaneamente uma fácil integração com os sistemas de manuseio e transferência de dados existentes.
O MicroCal PEAQ-DSC também está disponível como um sistema manual sem o amostrador automático.
Principais características
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Técnica de indicação da estabilidade padrão-ouro que exige pouco desenvolvimento de ensaio.
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Medição direta e livre de marcação da estabilidade biomolecular em estado nativo em soluções.
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O formato padrão de placa de 96 poços garante alta capacidade e fácil carregamento, com armazenamento termostaticamente controlado de até 6 placas.
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O amostrador automático totalmente integrado permite executar de forma autônoma até 50 amostras por dia.
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As funções automatizadas de enchimento celular e limpeza permitem operação autônoma.
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Medição de constantes de ligação muito próximas de até 1020M-1.
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O poderoso software MicroCal PEAQ-DSC reduz o tempo de análises de dados típicas
Dados e software
Os dados gerados pelo MicroCal PEAQ-DSC Automatizado fornecem orientações cruciais para o desenvolvimento biofarmacêutico em engenharia de proteínas, o desenvolvimento de (pré)formulações, o desenvolvimento de processos, o controle de alterações em produção e os estudos de biossimilaridade e biocomparabilidade.
A operação autônoma permite processamento durante as 24 horas do dia, enquanto que o software integrado simplifica os fluxos de trabalho, facilita a análise de dados não-subjetivos, a qualificação do desempenho e a conformidade com as normas 21 CFR, Parte 11 e Anexo 11, fornecendo dados de alta integridade e aumentando a produtividade na pesquisa biofarmacêutica.
O poderoso software MicroCal PEAQ-DSC reduz o tempo de análises de dados típicas e inclui:
- PEAQ-Compliance: o sistema está disponível com o Malvern Access Controller (MAC) para limitar o acesso aos POPs definidos pelo usuário e recursos de análise de dados. Os dados podem ser exibidos usando o Gerador de relatórios, com detalhes do usuário e a capacidade de utilizar assinaturas eletrônicas para facilitar a integração do fluxo de trabalho ao sistema de qualidade da sua empresa e contribuir para a conformidade com as normas 21 CFR, Parte 11 e Anexo 11. Isso é fornecido como um acessório opcional.
- PEAQ-Performance: detecta e valida automaticamente a prontidão do sistema para obter o desempenho ideal.
- PEAQ-Smart (incluindo o PEAQ-Finder): para operações e análises de dados baseadas em POP. Fornece novos algoritmos para detectar até mesmo picos sutis e “ombros”, facilitando a identificação automática e não-subjetiva de várias transições, como aquelas vistas em proteínas de vários domínios.
- PEAQ-Compare: para a comparação quantitativa de traços DSC em estudos de comparabilidade, sendo ideal para estudos de biossimilaridade e de lote a lote.
- Pronto para a rede: as atualizações são enviadas por e-mail durante as análises para mantê-lo informado sobre o andamento do ensaio.
O que é DSC?
A Calorimetria de Varredura Diferencial (DSC) é uma ferramenta analítica poderosa para caracterizar a estabilidade térmica de proteínas e outras biomoléculas. A técnica mede a entalpia (ΔH) e a temperatura (Tm) de transições estruturais termicamente induzidas das moléculas em solução. Essas informações fornecem visões valiosas sobre os fatores que estabilizam ou desestabilizam as proteínas, os ácidos nucleicos, os complexos micelares e outros sistemas macromoleculares.
Os dados são usados para prever a vida útil de produtos biomoleculares, incluindo produtos biofarmacêuticos, permitir comparações lote a lote e entre moléculas inovadoras e biossimilares, desenvolver estratégias de purificação, caracterizar e avaliar construções de proteínas e classificar as afinidades dos ligantes a seus alvos proteicos em programas de descoberta de medicamentos de pequenas moléculas.
A análise de dados e os parâmetros medidos/derivados são descritos mais detalhadamente na página sobre a tecnologia de Calorimetria de Varredura Diferencial.
Como funciona
As estruturas funcionais formadas pelas proteínas e por outras macromoléculas suportam as mudanças conformacionais induzidas por temperatura, como o desdobramento. Essas mudanças resultam na absorção do calor como resultado da redistribuição de ligações não covalentes na molécula. Os Calorímetros de Varredura Diferencial medem essa absorção de calor com bastante precisão.
O núcleo térmico do sistema MicroCal PEAQ-DSC contém uma célula de amostra (contendo a amostra de interesse) e uma célula de referência (contendo uma solução tampão correspondente), ambas armazenadas em uma camisa de isolamento. Essas duas células são sempre mantidas à mesma temperatura e, durante uma medição, elas são aquecidas a uma velocidade de varredura constante.
Conforme a molécula dentro da célula de amostra se desdobra, o calor é absorvido, criando uma diferença de temperatura (ΔT) entre a célula de amostra e a célula de referência. Isso resulta em um gradiente térmico em todas as unidades Peltier, criando uma tensão proporcional que, por sua vez, é convertida em energia para formar um loop de feedback nas unidades Peltier, a fim de retornar o valor de ΔT para zero.
Como o desdobramento de proteínas é um evento endotérmico, ele é observado como um deslocamento positivo no termograma. O ponto médio da transição de fusão desta proteína é a Tm e a área sob a curva é a entalpia (ΔH) do processo de desdobramento (veja a figura abaixo).
Aplicativos
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- Descoberta, Desenvolvimento e Fabricação de Bioterapêuticos
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O PEAQ-DSC Automatizado é amplamente confiado em toda a indústria biofarmacêutica para fornecer dados valiosos de estabilidade para bioterapêuticos em descoberta, desenvolvimento e fabricação. Isso se deve à natureza universal do método de detecção, à capacidade de detectar alterações muito sutis na conformação de medicamentos biológicos e à alta reprodutibilidade dos dados.
Webinar: Resolva problemas de estabilidade na pré-formulação e no desenvolvimento de processos usando DSC
Nota de aplicação: Usando Calorimetria Diferencial de Varredura para acelerar o desenvolvimento de formulações líquidas para biofármacos proteicos
- Biossimilaridade e Biocomparabilidade
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A natureza altamente reprodutível dos instrumentos MicroCal PEAQ-DSC e a capacidade da técnica de detectar até mesmo alterações em um único aminoácido de uma proteína têm sido os principais impulsionadores do uso de dados DSC em submissões para aprovação de medicamentos biossimilares. O software MicroCal PEAQ-DSC possui uma ferramenta de biossimilaridade para comparação estatística com o medicamento inovador.
- Caracterização de Conjugados Anticorpo-Fármaco e Vacinas
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DSC, DLS e outras técnicas biofísicas podem ser usadas para estudar a estabilidade de Candidatos a Conjugados Anticorpo-Fármaco e os efeitos das proporções entre anticorpo e fármaco sobre sua estabilidade e tendência à agregação. O exemplo abaixo também mostra como o DSC pode ser usado para medir a cinética de inativação por aquecimento em uma ampla faixa de velocidades de varredura.
Webinar: Caracterização biofísica e de estabilidade de conjugados anticorpo-fármaco
