Constante de asociación

¿Qué es la constante de asociación?

La constante de asociación es un parámetro cinético utilizado para medir las interacciones intermoleculares y los eventos de unión entre dos o más moléculas. La constante de la tasa de asociación (ka, kon o tasa de unión) es la velocidad a la que una molécula se une a la segunda para formar un complejo. Se registra en moles (la cuantificación estándar de la cantidad de moléculas) por segundo: M-1s-1.

¿Cómo se mide la constante de asociación?

Cuando se analiza la cinética de unión con algunos biosensores, como el Creoptix WAVEsystem, se inmoviliza una molécula en la superficie del biosensor (el chip) y se denomina el “ligando”. La segunda molécula se hace fluir más allá en un flujo microfluídico y se denomina “analito”. 

En primer lugar, la línea de base se establece pasando la solución amortiguadora más allá del sensor con un ligando inmovilizado. Después de esto, la muestra (analito) fluye más allá. El analito se asocia con el ligando durante la fase de asociación. A partir de aquí, se puede calcular la constante de asociación, como la velocidad a la que el analito se une al ligando para formar un complejo en la concentración estándar. Es por esto que se expresa en moles por segundo.  

La curva resultante de una medición de interacción de unión (un sensograma).

En conjunto, la tasa de asociación y la tasa de disociación (kd) definen la afinidad (constante de disociación de equilibrio, KD) y determinan la cinética de unión (la interacción dinámica entre dos moléculas). La KD se calcula como kd/ka y determina la concentración de analito a la que la mitad de los ligandos están ocupados por el analito en equilibrio.

¿Cómo se miden las constantes de asociación con el sistema Creoptix WAVEsystem?

La medición exacta y eficiente de las interacciones intermoleculares y los eventos de unión es un elemento esencial de una amplia variedad de estudios básicos, además de ser un componente indispensable de los programas de descubrimiento de fármacos. El sistema Creoptix WAVEsystem es un biosensor óptico que puede medir la constante de asociación mientras mide la cinética de unión.

EspecificaciónWAVEWAVEdelta
Asociación constante Alcance

ka = 103 – 5 x 107 M-1 s–1 (moléculas pequeñas)
ka = 103 – 3 x 109 M-1 s–1 (moléculas grandes)

ka = 103 – 5 x 107 M-1 s–1 (moléculas pequeñas)
ka = 103 – 3 x 109 M-1 s–1 (moléculas grandes)

Tabla de Creoptix WAVE | Plataforma de biosensor óptico

¿Qué otros métodos puedo utilizar para medir la constante de asociación?

Además del sistema WAVEsystem, que utiliza interferometría acoplada de rejilla (GCI, del inglés “Grating-Coupled Interferometry”), los métodos comunes para medir la constante de asociación son la interferometría de biocapa (BLI, del inglés “Biolayer Interferometry”) o la resonancia de plasmones superficiales (SPR, del inglés “Surface Plasmon Resonance”). En nuestra página de comparación de tecnología, puede obtener más información sobre las características de la BLI frente a la SPR y la GCI.

WAVEsystem

WAVEsystem

Instrumentos bioanalíticos de última generación para el descubrimiento de fármacos y las ciencias biológicas, tanto para la investigación industrial como académica