MicroCal PEAQ-ITC automatisé

Mesure à forte productivité de plusieurs paramètres de liaison.

MicroCal PEAQ-ITC automatisé est un calorimètre de titrage calorimétrique isotherme à haute sensibilité et de faible volume, présentant l'avantage d'un fonctionnement autonome. Il permet la mesure directement en solution, sans marquage, de tous les paramètres de liaison en une unique expérience. Ses applications incluent la caractérisation des interactions moléculaires de petites molécules, d'acides nucléiques, de lipides et autres biomolécules. Il peut également être utilisé pour la mesure des paramètres cinétiques des enzymes.

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Présentation générale

Le MicroCal PEAQ-ITC automatisé combine la grande sensibilité du MicroCal PEAQ-ITC – le calorimètre formant le cœur du système – avec la simplicité de l'automatisation, pour répondre aux exigences de productivité des laboratoires de recherche pharmaceutique. Le système mesure directement la chaleur libérée ou absorbée lors des événements d'interaction biochimique, à partir de laquelle il calcul l'affinité (KD), la stœchiométrie (n), l'enthalpie (ΔH), et l'entropie (ΔS) de l'interaction. Mis à part la préparation des échantillons et des réactifs aux concentrations appropriées, la mise au point du dosage et le temps avant obtention du premier résultat sont particulièrement réduits. Le logiciel, simple d'utilisation, comprend des scripts d'automatisation optimisés pour un fonctionnement robuste avec une variété d'échantillons et de conditions de mesures.

  • Des outils conviviaux facilitent le choix des paramètres expérimentaux.
  • Tous les paramètres de liaison (affinité, stœchiométrie, enthalpie et entropie) en une seule expérience.
  • Premier résultat obtenu très rapidement grâce à une mise au point de dosage minimale, pas de marquage, ni d'immobilisation et aucune limitation de la masse molaire.
  • Un rapport signal-bruit élevé offre une garantie supplémentaire de la qualité des données et la pertinence des paramètres thermodynamiques et d'affinité générés.
  • Excellente qualité des données pour des constantes de dissociation allant du sub millimolaire au picomolaires (10-2 à 10-12 M).
  • La forme en pièce de la cellule optimise le mélange de l'échantillon.
  • Hastelloy non réactif pour la résistance chimique et la compatibilité avec les échantillons biologiques.
  • Sensibilité pour l'étude des différentes interactions entre biomolécules nécessitant des quantités d'échantillon aussi petites que 10µg.
  • Échantillon présenté en plaque de 96 puits de température contrôlée.
  • Système entièrement automatisé au fonctionnement autonome pour plus de productivité.

Le logiciel d'analyse MicroCal PEAQ-ITC permet de réaliser des simulations pour concevoir des expériences, l'évaluation par lot d'ensembles de données volumineux et l'évaluation automatique de la qualité des données. Il dispose d'une interface rationalisée qui favorise la production de résultats chiffrés finaux et de graphiques de présentation de qualité, rapidement et en toute simplicité.

  • Plusieurs expériences peuvent être ouvertes lors d'une seule session.
  • Prend en charge de nombreux modèles d'ajustement automatique.
    • Dissociation.
    • Cinétique enzymatique - Injections multiples.
    • Cinétique enzymatique - Injection unique.
    • Un ensemble de sites.
    • Sites de liaison séquentielle.
    • Un ensemble de sites - SIM.
    • Deux ensembles de sites.
    • Compétition.
  • Évaluation automatique de la qualité des données.
    • Données de bonne qualité - Liaison.
    • Données de bonne qualité - Pas d'interaction.
    • Données de mauvaise qualité - Vérifier les données.

Fonctionnement

Les calorimètres de titrage microcalorimétrique isotherme mesurent la variation de chaleur qui a lieu lors de l'interaction entre deux molécules. De la chaleur est libérée ou absorbée du fait de la redistribution et de la formation de liaisons non covalentes quand les molécules en interaction passent de l'état libre à l'état lié. L'ITC surveille ces variations de chaleur en mesurant la puissance différentielle, appliquée aux éléments chauffants des cellules, nécessaire pour maintenir une différence de température nulle entre les cellules de référence et d'échantillon lors du mélange des partenaires de liaison. En général, la cellule de référence contient de l'eau, alors que la cellule d'échantillon contient un des partenaires de liaison (l'échantillon, qui est souvent mais pas forcément une macromolécule) et une seringue d'agitation contenant l'autre partenaire de liaison (le ligand). Le ligand est injecté dans la cellule d'échantillon, généralement par aliquots de 0,5 à 2 μL, jusqu'à ce que la concentration de ligand soit de deux à trois fois supérieure à celle de l'échantillon. Chaque injection de ligand produit une impulsion de chaleur qui est intégrée en fonction du temps et normalisée par rapport à la concentration pour générer une courbe de titrage donnant des kcal/mol en fonction du rapport molaire (ligand/échantillon). L'isotherme qui en résulte est ajustée à un modèle de liaison pour en déduire l'affinité (KD), la stœchiométrie (n) et l'enthalpie (ΔH) de l'interaction.

Microcalorimètres MicroCal PEAQ-ITC pour la microcalorimétrie et l'analyse sans marquage par titration calorimétrique isotherme

Microcalorimètres MicroCal PEAQ-ITC pour la microcalorimétrie et l'analyse sans marquage par titration calorimétrique isotherme

Spécifications

Type de mesure Affinité (KD)
Type de mesure Enthalpie ∆H
Type de mesure Entropie ∆S
Type de mesure Stœchiométrie (n)
Capacité d'échantillon 384 (quatre plaques de 96 puits)
Gamme de température du porte échantillon 4 °C ± 2 °C à la température ambiante
Volume d'échantillon 370 µL
Volume de la cellule 200 µL
Volume de la seringue d'injection 40 µL
Précision du volume d'injection < 1 % à 2 µL
Débit Jusqu'à 42 par 24 h (SIM)
Matériau de la cellule Hastelloy
Cellule En forme de pièce de monnaie
Bruit de fond 0,15 ncal/s
Plage de température De 2°C à 80°C
Stabilité en température ±0,00012 °C
Temps de réponse 8 s*
Modes de feedback multiple Oui (passif, gain élevé, gain faible)
Notes *The MicroCal PEAQ-ITC Instrument Response Time is a true time constant.  It is the time interval between the first deviation away from the baseline, and the point on the peak that is 63% of the maximum peak height.

Environnement opératoire

Température (de fonctionnement) De 10°C à 28°C
Humidité De 0 % à 70 % HR, sans condensation

Classification électrique

Alimentation électrique 100 - 240 V, 50/60 Hz, 400 W
Poids 91 kg
Dimensions (l, P, H) 63 x 58 x 77 cm

Assistance

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Assistance technique

Formation

  • Formation des utilisateurs

Téléchargements logiciels

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Pour les laboratoires où maximiser le temps de fonctionnement de l'appareil est essentiel à la performance quotidienne. Notre plus haut niveau de support « tout compris » intègre les factures de réparation inattendues qui peuvent malheureusement se produire.

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Contrat PlatineContrat GoldVisite préventive Bronze
Test annuel de maintenance préventive et vérification de performances
Oui
Oui
Non
Téléphone / Email du Service
Oui
Oui
Non
Réponse prioritaire
Oui
Oui
Non
Visites d'urgence en cas de panne*
Oui
Oui
Non
Pièces incluses
Oui
Non
Non
Support Technique & Logiciel
Oui
Oui
Oui
QI/QO (Pharma)***
Oui
Oui
Oui

*incluant frais de main d'œuvre & déplacement***disponible à un coût additionnel

Very good instrument, fast and easy to use.

Clarissa Melo Czekster — University of St Andrews
The "Gold Standard" for measuring binding affinity and stoichiometry

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Direct, label free and in-solution measurements of binding affinity and thermodynamic parameters in a single experiment to meet the varied and demanding requirements of today’s life science laboratories.

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