Übersicht
Messen Sie die schwierigsten Proben
Das innovative Fluidikdesign integriert die gesamte Mikrofluidik in die Einwegkartusche (nicht innerhalb des Gerätekerns) und platziert Standardventile mit großen Bohrungen im Instrument nachgeschaltet, statt auf Mikroventile in der Nähe des Chips zu setzen.
Durch die Kombination von Mikrofluidik und optischem Biosensor in einer einzigen Einwegkartusche bietet das WAVEsystem eine Robustheit für Rohproben, die normalerweise nur mit plattenbasierten Prüfungen erreicht wird. Zu den kompatiblen Probentypen gehören 100 % Serum oder Plasma, Zelllysate, Rohmembranpräparate, große Wirkstoffziele, virusähnliche Partikel (VLP), Liposomen und Aggregate (Fibrillen) ohne Verstopfungsrisiko.
Die chemikalienfreundliche Kartusche macht sie auch geeignet für die Arbeit mit hohen Konzentrationen von DMSO, Acetonitril und anderen organischen Lösungsmitteln, die typisch für Fragmentbibliotheken sind, sowie mit viskosen Reinigungsmitteln, die die Erforschung von Lösungs- und Reinigungsbedingungen für Membranproteine ermöglichen. Und da die Kartuschen in sich geschlossen und einmal verwendbar sind, eliminieren sie Kreuzkontaminationen, um Ihre Proben zu schützen und zuverlässigere Daten zu gewährleisten.
Keine Mikroventile für schnelle Übergänge
![[wave chip 1.png] wave chip 1.png](https://p3.aprimocdn.net/malvernpanalytical/8bbd4c8c-6ca5-4e05-8186-ae6000b80268/wave%20chip%201_Original%20file.png)
Das Kartuschendesign ermöglicht ultraschnelle Übergangszeiten von 150 ms für die zuverlässige Bestimmung von Off-Raten von 10 s–1 (Halbwertszeit von 69 ms), was die kinetische Untersuchung schwach bindender Fragmente ermöglicht.
Verstopfungsfrei für Rohproben
Verstopfungsfreie Mikrofluidik eignet sich für eine Vielzahl von Probentypen, um Aktivität und den biologischen Kontext aufrechtzuerhalten und so Zeit für schädliche Reinigungsschritte und Verstopfungen zu sparen, die andere Systeme außer Betrieb setzen.
Durch die Kombination der patentierten Gitter-gekoppelten Interferometrie (GCI) mit verstopfungsfreier Mikrofluidik liefert das Creoptix® WAVEsystem selbst bei den anspruchsvollsten Probentypen qualitativ hochwertige Daten und erzielt eine überlegene Signal- und Zeitauflösung im Vergleich zu anderen Formen der markerfreien Quantifizierung. Die markerfreie Ligandenimmobilisierung wird typischerweise durch kovalente Kopplung des Liganden mit dem Biosensor über natürlich vorkommende Aminogruppen (-NH2), Thiol (-SH2) oder Aldehyd (-COOH) oder durch Ligandenbindung an einen Antikörper erreicht, der selbst kovalent mit der Biosensoroberfläche verbunden wurde. Die Beibehaltung der Proben in nativer Konfiguration und unter physiologischen Bedingungen verringert das Risiko einer Proteininaktivierung oder Denaturierung, wodurch sichergestellt wird, dass die generierten Rohdaten eine getreue Darstellung der kinetischen Aktivität darstellen.
WAVEchip-Kompatibilität
| WAVEchip sensor | Sensor surface matrix | Immobilization modality | Suggested applications |
|---|---|---|---|
| PCP | Quasi-planar PC hydrogel | Amine coupling | Large ligands and/or analytes such as proteo-/liposomes, viruses, VLPs |
| PCP-STA | Pre-immobilized streptavidin
Quasi-planar PC hydrogel |
Biotin | Large biotinylated ligands, analytes such as liposomes, viruses, VLPs |
| PCP-RST | Regenerable streptavidin surface
Quasi-planar PC hydrogel |
Biotin | Large biotinylated ligands, ligand screening |
| PCP-PAG | Pre-immobilized fusion protein A/G
Quasi-planar PC hydrogel |
IgG | For capturing the broadest range of IgG and FC-tagged proteins |
| PCP-NTA | Pre-immobilized NTA
Quasi-planar PC hydrogel |
His-Tag | Large His-tagged ligands, analytes such as liposomes, viruses, VLPs |
| PCP-LIP | Pre-immobilized lipophilic groups
Quasi-planar PC hydrogel |
Lipid | Hydrophobic (large) ligands such as liposomes, membrane vesicles |
| PCZ | Functionalized with a zwitterionic polymer bearing carboxylic acids and tertiary amines in similar densities, quasi-planar PC hydrogel | Amine coupling | Low fouling, ideal for coupling proteins with low isoelectric points or polyanionic ligands |
| PCL | Low capacity, thick PC hydrogel with a lower amount of negative charges (approx. 25%) | Amine coupling | Complex matrices such as serum, culture supernatant. Requires sulfo-NHS for activation |
| PCH | Thick PC hydrogel | Amine coupling | Large ligand-to-analyte molecular weight ratio, general purpose |
| PCH-NTA | Pre-immobilized NTA
Thick PC hydrogel |
His-Tag | His-tagged ligands, general purpose |
| PCH-STA | Pre-immobilized streptavidin
Thick hydrogel |
Biotin | Biotinylated ligands, general purpose |
| PCH-RST | Regenerable streptavidin surface
Thick hydrogel |
Biotin | Biotinylated ligands, ligand screening |
| DXP | Quasi-planar DX hydrogel | Amine coupling | Large ligands and/or analytes such as proteo-/liposomes, viruses, VLPs |
| DXH-STA |
Pre-immobilized streptavidin
Thick DX hydrogel |
Biotin | Biotinylated ligands, general purpose |
| DXH | Thick DX hydrogel | Amine coupling | Large ligand-to-analyte molecular weight ratio, general purpose |
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PC- = polycarboxylate, DX- = Carboxymethyldextran.
DX coated sensors available upon request |
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Häufig gestellte Fragen
-
- Womit sind WAVEchips® kompatibel?
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- 100 % Serum, Plasma und Zellüberstand
- Nicht traditionelle Lösungsmittel, einschließlich hoher Anteile an Acetonitril und DMSO
- Viskose Reinigungsmittel und Additive zum Lösen von Membranproteinen
- Zellmembran-Preps, teilgelöstes, ungereinigtes Material
- Virusähnliche Partikel (VLP), Liposomen oder Nanodisks, die als Lösungsstrukturen verwendet werden
- Große Bindungspartner: Nanopartikel und Rohmembran-Preps
- Wie oft kann ich die WAVEchips verwenden?
- Dies hängt von der Art des WAVEchip®, der verwendeten Immobilisierungsmethode und dem Verhalten des immobilisierten Liganden ab. So können beispielsweise HIS-markierte Ligandenproteine, die auf einer Ni-NTA-Oberfläche erfasst wurden, durch EDTA regeneriert und der Ligand mehrmals frisch neu erfasst werden. Dies bedeutet, dass ein solcher Chip in der Regel wiederholt verwendet werden kann, sofern er in das Creoptix® WAVEsystem eingesetzt bleibt. Regenerationen sind sowohl mit Ni-NTA- als auch mit Protein-A/G-Chips möglich, was eine mehrfache Verwendung ermöglicht, jedoch ist dies mit Streptavidin oder anderen Chips nicht leicht zu erreichen.
- Wie viel Ligand können Sie auf den Chips immobilisieren?
- Die Immobilisierungskapazität hängt vom Chiptyp und der Immobilisierungsmethode ab. Der Chip mit der höchsten Kapazität im Creoptix® WAVEsystem-Portfolio, der 4PCH WAVEchip, kann bis zu 35.000 pg/mm2 BSA immobilisieren, die experimentelle Kapazität hängt jedoch vom genauen verwendeten Liganden ab. Die WAVEcontrol-Software verfügt über einen integrierten Simulator, der bei der Bestimmung der Ligandendichte hilft, die für ein akzeptables theoretisches Ansprechen erforderlich ist.