Información general
El PEAQ-DSC Automatizado, una tecnología MicroCal, de alto rendimiento y alta sensibilidad cuenta con un software que optimiza el flujo de trabajo a través de una configuración experimental simplificada y una programación flexible del instrumento.
El análisis de datos automatizado permite generar datos de estabilidad térmica de alta integridad y cumplir con requisitos regulatorios, a la vez que permite la integración sencilla en sistemas de manipulación y transferencia de datos existentes.
El PEAQ-DSC está también disponible como un sistema manual sin muestreador automático.
Características clave
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Técnica de referencia indicadora de estabilidad que requiere de un desarrollo mínimo de ensayo
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Medición directa y libre de marcadores de la estabilidad biomolecular en estado nativo en solución
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Formato estándar de placa de 96 pozos de alta capacidad y facilidad de carga, con un almacenamiento controlado por termostato de hasta 6 placas
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El muestreador automático totalmente integrado permite analizar hasta 50 muestras por día sin intervención
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Las funciones automatizadas de llenado y limpieza de celdas permiten una operación autónoma
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Mide constantes de enlace muy ajustadas de hasta 1020M-1.
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El potente software MicroCal PEAQ-DSC minimiza el tiempo habitual de análisis de datos
Datos y software
Los datos generados por el sistema MicroCal PEAQ-DSC automatizado entregan una orientación fundamental para el desarrollo biofarmacéutico en la ingeniería de proteínas, el desarrollo de la formulación (previa), el desarrollo de procesos, el control de los cambios en la fabricación y los estudios de biosimilitud y biocomparabilidad.
La operación autónoma permite realizar pruebas durante 24 horas, mientras que el software agiliza el flujo de trabajo, facilita el análisis no subjetivo de los datos, la calificación del desempeño y el cumplimiento de las normas 21 CFR Part 11 y Annex 11. Asimismo, genera datos de alta integridad y aumenta la productividad en la investigación biofarmacéutica.
El potente software MicroCal PEAQ-DSC minimiza el tiempo habitual de análisis de datos e incluye:
- PEAQ-Compliance: el sistema cuenta con Malvern Access Controller (MAC) para limitar el acceso a SOP definidos por usuario y a las funciones de análisis de datos. Los datos se pueden mostrar usando el generador de reportes con detalles del usuario y la habilidad de incorporar firmas electrónicas para facilitar la integración del flujo de trabajo en el sistema de calidad de su empresa y ayudar en el cumplimiento de las normas 21 CFR Part 11 y Annex 11. Esto se incluye como un accesorio opcional.
- PEAQ-Performance: detecta y valida automáticamente la disponibilidad del sistema para un desempeño óptimo.
- PEAQ-Smart (incluido PEAQ-Finder): para operaciones y análisis de datos basados en SOP Proporciona nuevos algoritmos para detectar incluso picos y picos adyacentes imperceptibles, lo que facilita la identificación automática no subjetiva de varias transiciones, como las que se observan en proteínas multidominio.
- PEAQ-Compare: para la comparación cuantitativa de trazas de DSC para estudios de comparabilidad, ideal para estudios de lote a lote y biosimilitud
- Apto para trabajar en red: actualizaciones por correo electrónico enviadas durante el análisis para mantenerlo informado del progreso del ensayo
¿Qué es DSC?
La calorimetría de barrido diferencial (DSC) es una potente herramienta de análisis para la caracterización de la estabilidad térmica de proteínas y otras biomoléculas. La técnica mide la entalpía (ΔH) y la temperatura (Tm) de las transiciones estructurales inducidas por calor de moléculas en solución. Esta información permite conocer en profundidad los factores que estabilizan o desestabilizan las proteínas, los ácidos nucleicos, los complejos micelares y otros sistemas macromoleculares.
Los datos se utilizan para predecir la vida útil de productos biomoleculares, incluso biofarmacéuticos, para poder realizar comparaciones lote a lote y de medicamento biosimilar versus molécula innovadora, para desarrollar estrategias de purificación, para caracterizar y evaluar constructos de proteínas, y para calificar las afinidades de ligandos con sus proteínas dianas en programas de descubrimiento de medicamentos de pequeñas moléculas.
El análisis de datos y los parámetros medidos/derivados se describen de forma más detallada en la página de tecnología de calorimetría de barrido diferencial.
Cómo funciona
Por lo general, las estructuras funcionales formadas por proteínas y otras macromoléculas sufren cambios conformacionales inducidos por la temperatura, como el despliegue. Estos cambios permiten la absorción del calor como resultado de la redistribución de enlaces no covalentes dentro de la molécula. Los calorímetros de barrido diferencial miden esta absorción de calor de manera muy precisa.
El núcleo térmico del sistema MicroCal PEAQ-DSC posee una celda para muestras (que contiene la muestra de interés) y una celda de referencia (que contiene una solución tampón compatible), las cuales están alojadas dentro de un recubrimiento térmico. Estas dos celdas se mantienen siempre a la misma temperatura y, durante la medición, se calientan con un incremento de barrido constante.
A medida que se despliega la molécula dentro de la celda para muestras, se absorbe el calor, lo que crea una diferencia de temperatura (ΔT) dentro de la celda para muestras y la celda de referencia. Esto genera un gradiente térmico en todas las unidades Peltier, lo que crea un voltaje proporcional que, a su vez, se convierte en energía para formar un bucle de retroalimentación para las unidades Peltier, con el fin de regresar la ΔT a cero.
Dado que el despliegue de la proteína es un evento endotérmico, se observa como un desplazamiento positivo en el termograma. El punto medio de esta transición de 'fusión' de la proteína es la Tm y el área bajo la curva es la entalpía (ΔH) del proceso de despliegue (consulte la ilustración más abajo).
Aplicaciones
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- Descubrimiento, Desarrollo y Fabricación de Bioterapéuticos
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El PEAQ-DSC Automatizado es ampliamente confiado en toda la industria biofarmacéutica para proporcionar datos valiosos de estabilidad para bioterapéuticos en descubrimiento, desarrollo y fabricación. Esto se debe a la naturaleza universal del método de detección, la capacidad de detectar cambios muy sutiles en la conformación de medicamentos biológicos y la alta reproducibilidad de los datos.
Webinar: Resuelva problemas de estabilidad en la preformulación y en el desarrollo de procesos usando DSC
Nota de aplicación: Uso de Calorimetría Diferencial de Barrido para acelerar el desarrollo de formulaciones líquidas para biofármacos proteicos
- Biosimilitud y Biocomparabilidad
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La naturaleza altamente reproducible de los instrumentos MicroCal PEAQ-DSC y la capacidad de la técnica para detectar incluso cambios en un solo aminoácido de una proteína han sido los principales impulsores del uso de datos DSC en las solicitudes de aprobación de medicamentos biosimilares. El software MicroCal PEAQ-DSC cuenta con una herramienta de biosimilitud para la comparación estadística con el medicamento innovador.
- Caracterización de Conjugados Anticuerpo-Fármaco y Vacunas
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DSC, DLS y otras técnicas biofísicas pueden utilizarse para estudiar la estabilidad de Candidatos a Conjugados Anticuerpo-Fármaco y los efectos de las proporciones entre anticuerpo y fármaco sobre su estabilidad y tendencia a la agregación. El ejemplo siguiente también muestra cómo el DSC puede utilizarse para medir la cinética de inactivación por calentamiento en un amplio rango de velocidades de barrido.
Webinar: Caracterización biofísica y de estabilidad de conjugados anticuerpo-fármaco
