生物製劑開發中的物性評價技術：製造工藝

介紹生物製劑開發各階段中應評估的項目，以及可進行評估的Malvern Panalytical測量技術。此頁面詳細介紹“製造工藝”。

基於平均顆粒徑和PdI評價尺寸變化（DLS・SLS）

製造工藝前後抗體尺寸變化的比較

因為蛋白質由對調製方法、保存方法、緩衝液等多種處理條件敏感的多肽鏈組成，所以了解製造工藝中的物性變化是很重要的。使用動態光散射法（DLS）及靜態光散射法（SLS）可以進行聚集和碎片化的評價。下圖展示了未處理和處理後的治療用抗體的DLS結果。橫軸是尺寸，縱軸是光強度分佈（Intensity(%)）。未處理的抗體樣品（藍色）的平均顆粒徑約為11 nm，而處理後（紅色）的平均顆粒徑約為50 nm，確認了聚集體的存在。這結果提示處理前後抗體樣品有變化。此外，未處理的抗體樣品，其分佈度表現為多分散指數（PdI）超過0.14和0.1，分佈寬廣，還提示小抗體碎片的存在。這結果和表中顯示的兩個治療用抗體的SLS求得的絕對分子量略小於理論值145 kDa的結果一致。

通過詳細監控DLS和SLS的尺寸變化可以確認在商品化道路上的聚集和碎片化。

表：靜態光散射測量結果

利用平均顆粒徑優化製劑（DLS）

觀察藥物載入微乳液的尺寸變化隨時間的演變

微乳液的尺寸特性對於確保安全和高效的給藥至關重要。通過DLS監控尺寸分佈的變化，可以獲得優化製劑的重要資訊。圖中上方顯示微乳液中藥物的引入影響。橫軸是尺寸，縱軸是光強度分佈（Intensity(%)）。紅色表示僅有微乳液，綠色表示微乳液+藥物的結果。確認藥物引入後，無藥物包含的數十nm主要峰向右移動，尺寸變大。約2 μm的峰表示從微乳液中洩漏出的不可溶性藥物。此外，下方監控稀釋後的藥物微乳液的平均徑隨時間的變化。縱軸是Z平均顆粒徑。如果藥物不溶出，平均直徑應保持不變，尺寸變大與藥物洩漏相關聯。

因此，通過跟踪微乳液平均直徑的變化，還可以檢查洩漏的藥物比例。

通過監控使用DLS的微乳液尺寸變化，可以優化製劑。

利用散射光進行高濃度化后的SVP濃度定量（NTA）

通過BSA的高濃度實現的SVP檢測

在製造工藝後期，蛋白質濃度變高，因此評估在此狀態下的分散穩定性是重要的。

納米顆粒跟踪分析（NTA）可以檢測溶液中光學顯微鏡不可見的亞微米、納米尺寸顆粒，因此適合SVP的濃度定量。

下圖顯示了在相同處方下，使用NTA分析不同濃度的BSA溶液中包含的SVP。比較各BSA濃度的顆粒徑分佈，50 mg/mL（藍色）中幾乎檢測不到超過400 nm的顆粒，隨濃度增加，超過400 nm的比例增大。

因此，使用NTA可以測量隨樣品濃度變化的SVP濃度變化。

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