Técnicas de evaluación de propiedades en el desarrollo de biofármacos: Biosimilares

En cada etapa del desarrollo de biofármacos, se presentan los ítems que deben evaluarse y las técnicas de medición de Malvern Panalytical que permiten dicha evaluación. En esta página, brindamos detalles sobre los «biosimilares».

Evaluación de equivalencia mediante SEC-LS (SEC-LS)

Ejemplo de comparación del tamaño de partículas y agregados con Bevacizumab

Bevacizumab (Bevacizumab) es un anticuerpo monoclonal contra el factor de crecimiento endotelial vascular, utilizado como medicamento antineoplásico. Se midieron el Bevacizumab (innovador) y su biosimilar usando cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) conectada con un detector de dispersión de luz (LS), y se compararon sus señales. La señal RI mostró pequeñas diferencias, pero en general las curvas son similares. Asimismo, las señales de dispersión de luz (RALS) también detectaron de manera similar el monómero y el dímero. Sin embargo, el biosimilar mostró un pico que sugiere la presencia de agregados no presentes en el innovador, indicando las características de dispersión de luz. Esto no era visible solo con la señal RI, por lo que conectar múltiples detectores a SEC permite una comparación más detallada entre el innovador y el biosimilar.

Con el uso de SEC-LS, es posible evaluar incluso pequeñas mezclas de agregados no detectables por UV o RI, lo que permite debatir sobre la relevancia de un biosimilar.

Evaluación de equivalencia mediante DSC (DSC)

Comparación de la estabilidad estructural con Remicade

La OMS presenta directrices sobre la calidad y seguridad de biofármacos obtenidos por recombinación genética. Éstas indican la necesidad de verificar la estructura terciaria (HOS), destacando como uno de los métodos la calorimetría diferencial de barrido (DSC).

En la figura, se compara si los biosimilares Renflexis (izquierda) e Inflectra (derecha) del anticuerpo monoclonal anti-TNF-α humano, Remicade, tienen estabilidad estructural terciaria equivalente al innovador. Se realizaron las mediciones utilizando un tampón con condiciones de formulación idénticas. Aunque ambas muestran formas equivalentes al innovador Remicade (línea continua), Renflexis desvia ligeramente en el rango de 68-75 °C (área resaltada), sugiriendo una mayor equivalencia de Inflectra.

La evaluación de biosimilares usando DSC permite evaluar la equivalencia con el innovador comparando las formas de los datos como huellas dactilares.

Evaluación de SVP mediante NTA (NTA)

Comparación SVP entre innovador y biosimilar

Es deseable que los biosimilares tengan menos agregados (SVP) en comparación con el innovador.

En la figura se muestran los resultados del análisis SVP usando Nanoparticle Tracking Analysis (NTA) en dos fármacos anticuerpo, innovador y biosimilar. Generalmente, el análisis de SVP se realiza con SEC, cuyo límite superior es de aproximadamente 100 nm, una limitación que NTA supera al cubrir el rango submicrométrico. La concentración de SVP detectada es mayor en el innovador, lo que sugiere un posible diferencial en el riesgo de inmunogenicidad del biosimilar.

El uso de NTA permite la evaluación cuantitativa de SVP, que no era posible con métodos tradicionales como SEC.

Evaluación de estabilidad multianálisis (DLS・SLS・ELS・DSC・NTA)

Comparación multianálisis de innovadores y biosimilares de anticuerpos terapéuticos

Se presentan los resultados de una comparación de estabilidad entre anticuerpos innovadores y biosimilares usando diversas técnicas provistas por Malvern Panalytical.

Los resultados de la dependencia de concentración del coeficiente de difusión DLS (kD) muestran que el innovador presenta una disminución del coeficiente de difusión con el aumento de la concentración, mientras que en el biosimilar, este coeficiente incrementa. Los datos de medición DLS revelan que el biosimilar tiene una dependencia de concentración diferente en su forma y un menor tamaño de partícula comparado con el innovador, sugiriendo una mejor estabilidad de dispersión para el biosimilar debido a la mayor fuerza repulsiva entre moléculas que incrementa el coeficiente de difusión aparente. Además, la correlación observada entre T_agg de DLS y T_m de DSC sugiere también mayor estabilidad del biosimilar respecto al calor. Las diferencias en C_total y SVP detectadas mediante NTA indican la formación de masas moleculares variadas, siendo mayores en el innovador. Este resultado se alinea con otras técnicas de medición.

Estas técnicas ofrecidas por Malvern Panalytical permiten una evaluación multianálisis del significado de biosimilares.

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