Use of the new MicroCal PEAQ-ITC system for measurement and characterization of a broad range of protein-LMW compound interactions
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Das PEAQ-ITC, eine MicroCal-Technologie, ist ein hochempfindliches isothermes Titrationskalorimeter mit geringem Volumen für die markierungsfreie Untersuchung biomolekularer Wechselwirkungen in Lösung.Es ermöglicht die direkte Messung aller Bindungsparameter in einem einzigen Experiment und kann Wechselwirkungen mit niedriger bis hoher Affinität analysieren. Dabei werden lediglich 10 µg Probe benötigt. Durch die halb automatisierte Wartung wird ein Eingreifen durch den Anwender minimiert. Das System kann auf das vollständig automatisierte Modell MicroCal PEAQ-ITC Automated erweitert werden. Somit eignet es sich ideal für Labore, in denen Schnelligkeit, Empfindlichkeit und die Fähigkeit entscheidend ist, in Zukunft höhere Arbeitsbelastungen zu bewältigen.
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Das MicroCal PEAQ-ITC ist für einfache Bedienung und hervorragende Empfindlichkeit ausgelegt. Die Methode basiert auf der direkten Messung der Wärme, die bei biomolekularen Bindungsereignissen abgegeben oder aufgenommen wird, woraus die Bindungsaffinität (KD), die Stöchiometrie (n), die Enthalpie (ΔH) und die Entropie (ΔS) berechnet werden. Mit minimaler Probenvorbereitung und Systemoptimierung können Daten schnell und einfach generiert werden. Der große Affinitätsbereich ermöglicht die Analyse von Wechselwrikungen mit niedriger bis hoher Affinität mit hervorragender Reproduzierbarkeit. MicroCal ITC ist ein unabkömmliches Werkzeug für alle Labore, in denen biomolekulare Interaktionen erforscht werden und hohe Empfindlichkeit sowie schnelle Ergebnisse von primärer Bedeutung sind.
Das MicroCal PEAQ-ITC deckt eine Vielzahl von Anwendungen ab. Hierzu gehört auch die Charakterisierung molekularer Wechselwirkungen von kleinen Molekülen, Proteinen, Antikörpern, Nukleinsäuren, Lipiden und anderen Biomolekülen. Das Gerät kann auch zur Messung von Enzymkinetiken eingesetzt werden.
Die Analysesoftware MicroCal PEAQ-ITC bietet eine Simulation für den Aufbau von Experimenten, chargenweise Auswertung großer Datensätze, automatisierte Bewertung der Datenqualität und eine geradlinige Benutzeroberfläche, über die der Benutzer schnell und einfach zu Endergebnissen und Graphen in Präsentationsqualität gelangt.
Isotherme Titrations-Mikrokalorimeter messen die Wärmemengenänderung, die auftritt, wenn zwei Moleküle in Wechselwirkung treten. Infolge der Umverteilung und Bildung nichtkovalenter Bindungen, wenn die interagierenden Moleküle vom freien in den gebundenen Zustand übergehen, wird Wärme aufgenommen oder abgegeben. Die ITC überwacht diese Wärmemengenänderungen, indem sie den Leistungsunterschied der Zellenheizungen misst, der benötigt wird, um den Temperaturunterschied zwischen der Referenz- und der Probenzelle auf null zu halten, wenn die Bindungspartner vermischt werden. Die Referenzzelle enthält üblicherweise Wasser, während die Probenzelle einen der Bindungspartner (die Probe, die oft aber nicht unbedingt ein Makromolekül ist) und eine Rührspritze enthält, in der der andere Bindungspartner (der Ligand) aufgenommen ist. Der Ligand wird in die Probenzelle injiziert, üblicherweise in Aliquoten von 0,5 bis 2 μl, bis die Konzentration des Liganden das Zwei- bis Dreifache der Probe beträgt. Jede Injektion der Liganden bewirkt einen Wärmeimpuls, der über die Zeit integriert und hinsichtlich der Konzentration normalisiert wird. Die Auftragung dieser kcal/mol-Werte gegen das molare Verhältnis (Ligand/Probe) liefert anschließend die Titrationskurve. Die resultierende Isotherme wird an ein Bindungsmodell angepasst, um die Werte für die Affinität (KD), die Stöchiometrie (n) und die Enthalpie der Wechselwirkung (ΔH) zu generieren.
| Typ der Messung | Affinität (KD)
Enthalpie ∆H Entropie ∆S Stöchiometrie (n) |
|---|---|
| Probenvolumen | 280 µL |
| Zellvolumen | 200 µL |
| Volumen der Injektionsspritze | 40 µL |
| Präzision des Injektionsvolumes | < 1% bei 2 µL |
| Probendurchsatz | 0-12 pro 8 h Tag |
| Zellenmaterial | Hastelloy |
| Zelle | Münzförmig |
| Rauschen | 0,15 ncal/s |
| Temperaturbereich | 2 °C bis 80 °C |
| Temperaturstabilität | ± 0.00012°C |
| Response-Zeit | 8 s* |
| Mehrfach Feedback Modi | Ja (passiv, hohe Verstärkung, niedrige Verstärkung) |
| Hinweise | *Die Ansprechzeit des Gerätes MicroCal PEAQ-ITC ist eine echte Zeitkonstante. Sie ist das Zeitintervall zwischen der ersten Abweichung von der Basislinie und dem Punkt bei 63 % der maximalen Peakhöhe. |
| Arbeitstemperatur (°C) | 10 °C bis 28 °C |
|---|---|
| Luftfeuchtigkeit | 0 % bis 70 % RH, nicht kondensierend |
| Versorgung | 100 - 240 VAC (Netzteil), 24 VDC (Stromversorgung des Instruments)
50/60 Hz, 150 W |
|---|---|
| Gewicht | 13,6 kg |
| Abmessungen (B, T, H) | 43 x 38 x 46 cm (Kalorimeter mit Waschstation) |
Die MicroCal PEAQ-ITC-Instrumente bieten wertvolle Einblicke für eine Vielzahl von Anwendungen, von denen einige unten aufgeführt sind.
ITC eignet sich ideal zur Messung hochpräziser Affinitäten und Stöchiometrien biologischer Interaktionen. Es erfordert weder eine Markierung noch eine Immobilisierung der interagierenden Moleküle und hat keine Einschränkungen in Bezug auf die Molekülmasse. Tausende wissenschaftliche Publikationen haben ITC zur Untersuchung biologischer Interaktionen mit Proteinen, Nukleinsäuren, Antikörpern, Kohlenhydraten, Lipiden, ATP, Inhibitoren und Arzneimitteln genutzt.
Wo bindet das Ligand an das Zielmolekül? An der aktiven Stelle oder an einer allosterischen Stelle? Ist die Interaktion kompetitiv, nicht-kompetitiv oder unkompetitiv in Bezug auf andere Liganden und Cofaktoren? Ist die Bindung kooperativ?
ITC ermöglicht wertvolle Einblicke in diese Bindungs- und Interaktionsmechanismen.
Haben Sie einen einfachen Assay für Ihr Enzym? Ist Ihr Assay-Setup komplex? Beeinträchtigt eine Modifikation Ihres Substrats Ihre SAR- oder mechanistischen Studien?
ITC kann für jede enzymatische Reaktion eingesetzt werden und benötigt nur Nano- bis Pikogramm-Mengen an Material – und das völlig markierungsfrei.
ITC wird häufig zur Bestimmung von CMCs einer Vielzahl von Mizellenkomplexen verwendet, darunter Tenside, Blockcopolymere, oberflächenaktive Peptide und Proteine sowie aminosäurebasierte Tenside und aminofunktionalisierte Lipide.
Versionsnummer: MAN0578-03-EN-00
Versionsnummer: MAN0579-03-EN-00
Versionsnummer: MAN0573-02-EN-00
Versionsnummer: MAN0576-01-EN-00
Versionsnummer: MAN0572-01-EN-00
PEAQ-ITC Control Software v1.52 (manual system)
PEAQ-ITC Analysis Software v1.52
Analysis Software
Control Software
Analysis Software
Control Software
Control Software
Analysis Software
Mit den Malvern Panalytical Service-Verträgen sichern Sie sich die langfristige und optimierte Funktionsfähigkeit Ihrer Analysegeräte.
Der Kauf eines Malvern Panalytical-Produkts ist für uns erst der Beginn einer langjährigen Geschäftsbeziehung über die gesamte Lebensdauer des Gerätes, die Malvern Panalytical entsprechend Ihrem individuellen Bedarf gerne mit seinen Services unterstützt.
Für Labore bei denen die Geräte-Verfügbarkeit für die tägliche Arbeit kritisch ist. Der all-inclusive Vertrag sichert kürzeste Reaktionszeiten zu und deckt alle Wartungskosten, aber auch unerwarteten Reparaturkosten ab.
Stellen Sie die Produktivität Ihres Labors durch die regelmäßige Wartung Ihres Systems sicher und erhalten Sie einen schnellen, spezialisierten und kompetenten Support im Störungsfall.
Für Labore die eine einmalige vorbeugende Wartung oder Support-Leistung wünschen.
| Platin Vertrag | Gold Vertrag | Bronze Vertrag | |
|---|---|---|---|
| Jährliche Wartung und Verifizierung |
Ja
|
Ja
|
Nein
|
| Telefon / E-Mail Support |
Ja
|
Ja
|
Nein
|
| Fixe Reaktionszeiten |
Ja
|
Ja
|
Nein
|
| Notfall-Besuch im Störungsfall* |
Ja
|
Ja
|
Nein
|
| Ersatzteile inklusive |
Ja
|
Nein
|
Nein
|
| Technik & Software Support |
Ja
|
Ja
|
Ja
|
| IQ/OQ (Pharma)*** |
Ja
|
Ja
|
Ja
|
*inklusive Arbeits- und Anfahrtskosten***gegen geringen Aufpreis möglich
Das MicroCal PEAQ-ITC ist für einfache Bedienung und hervorragende Empfindlichkeit ausgelegt. Die Methode basiert auf der direkten Messung der Wärme, die bei biomolekularen Bindungsereignissen abgegeben oder aufgenommen wird, woraus die Bindungsaffinität (KD), die Stöchiometrie (n), die Enthalpie (ΔH) und die Entropie (ΔS) berechnet werden. Mit minimaler Probenvorbereitung und Systemoptimierung können Daten schnell und einfach generiert werden. Der große Affinitätsbereich ermöglicht die Analyse von Wechselwrikungen mit niedriger bis hoher Affinität mit hervorragender Reproduzierbarkeit. MicroCal ITC ist ein unabkömmliches Werkzeug für alle Labore, in denen biomolekulare Interaktionen erforscht werden und hohe Empfindlichkeit sowie schnelle Ergebnisse von primärer Bedeutung sind.
Das MicroCal PEAQ-ITC deckt eine Vielzahl von Anwendungen ab. Hierzu gehört auch die Charakterisierung molekularer Wechselwirkungen von kleinen Molekülen, Proteinen, Antikörpern, Nukleinsäuren, Lipiden und anderen Biomolekülen. Das Gerät kann auch zur Messung von Enzymkinetiken eingesetzt werden.
Die Analysesoftware MicroCal PEAQ-ITC bietet eine Simulation für den Aufbau von Experimenten, chargenweise Auswertung großer Datensätze, automatisierte Bewertung der Datenqualität und eine geradlinige Benutzeroberfläche, über die der Benutzer schnell und einfach zu Endergebnissen und Graphen in Präsentationsqualität gelangt.
Isotherme Titrations-Mikrokalorimeter messen die Wärmemengenänderung, die auftritt, wenn zwei Moleküle in Wechselwirkung treten. Infolge der Umverteilung und Bildung nichtkovalenter Bindungen, wenn die interagierenden Moleküle vom freien in den gebundenen Zustand übergehen, wird Wärme aufgenommen oder abgegeben. Die ITC überwacht diese Wärmemengenänderungen, indem sie den Leistungsunterschied der Zellenheizungen misst, der benötigt wird, um den Temperaturunterschied zwischen der Referenz- und der Probenzelle auf null zu halten, wenn die Bindungspartner vermischt werden. Die Referenzzelle enthält üblicherweise Wasser, während die Probenzelle einen der Bindungspartner (die Probe, die oft aber nicht unbedingt ein Makromolekül ist) und eine Rührspritze enthält, in der der andere Bindungspartner (der Ligand) aufgenommen ist. Der Ligand wird in die Probenzelle injiziert, üblicherweise in Aliquoten von 0,5 bis 2 μl, bis die Konzentration des Liganden das Zwei- bis Dreifache der Probe beträgt. Jede Injektion der Liganden bewirkt einen Wärmeimpuls, der über die Zeit integriert und hinsichtlich der Konzentration normalisiert wird. Die Auftragung dieser kcal/mol-Werte gegen das molare Verhältnis (Ligand/Probe) liefert anschließend die Titrationskurve. Die resultierende Isotherme wird an ein Bindungsmodell angepasst, um die Werte für die Affinität (KD), die Stöchiometrie (n) und die Enthalpie der Wechselwirkung (ΔH) zu generieren.
| Typ der Messung | Affinität (KD)
Enthalpie ∆H Entropie ∆S Stöchiometrie (n) |
|---|---|
| Probenvolumen | 280 µL |
| Zellvolumen | 200 µL |
| Volumen der Injektionsspritze | 40 µL |
| Präzision des Injektionsvolumes | < 1% bei 2 µL |
| Probendurchsatz | 0-12 pro 8 h Tag |
| Zellenmaterial | Hastelloy |
| Zelle | Münzförmig |
| Rauschen | 0,15 ncal/s |
| Temperaturbereich | 2 °C bis 80 °C |
| Temperaturstabilität | ± 0.00012°C |
| Response-Zeit | 8 s* |
| Mehrfach Feedback Modi | Ja (passiv, hohe Verstärkung, niedrige Verstärkung) |
| Hinweise | *Die Ansprechzeit des Gerätes MicroCal PEAQ-ITC ist eine echte Zeitkonstante. Sie ist das Zeitintervall zwischen der ersten Abweichung von der Basislinie und dem Punkt bei 63 % der maximalen Peakhöhe. |
| Arbeitstemperatur (°C) | 10 °C bis 28 °C |
|---|---|
| Luftfeuchtigkeit | 0 % bis 70 % RH, nicht kondensierend |
| Versorgung | 100 - 240 VAC (Netzteil), 24 VDC (Stromversorgung des Instruments)
50/60 Hz, 150 W |
|---|---|
| Gewicht | 13,6 kg |
| Abmessungen (B, T, H) | 43 x 38 x 46 cm (Kalorimeter mit Waschstation) |
Die MicroCal PEAQ-ITC-Instrumente bieten wertvolle Einblicke für eine Vielzahl von Anwendungen, von denen einige unten aufgeführt sind.
ITC eignet sich ideal zur Messung hochpräziser Affinitäten und Stöchiometrien biologischer Interaktionen. Es erfordert weder eine Markierung noch eine Immobilisierung der interagierenden Moleküle und hat keine Einschränkungen in Bezug auf die Molekülmasse. Tausende wissenschaftliche Publikationen haben ITC zur Untersuchung biologischer Interaktionen mit Proteinen, Nukleinsäuren, Antikörpern, Kohlenhydraten, Lipiden, ATP, Inhibitoren und Arzneimitteln genutzt.
Wo bindet das Ligand an das Zielmolekül? An der aktiven Stelle oder an einer allosterischen Stelle? Ist die Interaktion kompetitiv, nicht-kompetitiv oder unkompetitiv in Bezug auf andere Liganden und Cofaktoren? Ist die Bindung kooperativ?
ITC ermöglicht wertvolle Einblicke in diese Bindungs- und Interaktionsmechanismen.
Haben Sie einen einfachen Assay für Ihr Enzym? Ist Ihr Assay-Setup komplex? Beeinträchtigt eine Modifikation Ihres Substrats Ihre SAR- oder mechanistischen Studien?
ITC kann für jede enzymatische Reaktion eingesetzt werden und benötigt nur Nano- bis Pikogramm-Mengen an Material – und das völlig markierungsfrei.
ITC wird häufig zur Bestimmung von CMCs einer Vielzahl von Mizellenkomplexen verwendet, darunter Tenside, Blockcopolymere, oberflächenaktive Peptide und Proteine sowie aminosäurebasierte Tenside und aminofunktionalisierte Lipide.
Versionsnummer: MAN0578-03-EN-00
Versionsnummer: MAN0579-03-EN-00
Versionsnummer: MAN0573-02-EN-00
Versionsnummer: MAN0576-01-EN-00
Versionsnummer: MAN0572-01-EN-00
PEAQ-ITC Control Software v1.52 (manual system)
PEAQ-ITC Analysis Software v1.52
Analysis Software
Control Software
Analysis Software
Control Software
Control Software
Analysis Software
Mit den Malvern Panalytical Service-Verträgen sichern Sie sich die langfristige und optimierte Funktionsfähigkeit Ihrer Analysegeräte.
Der Kauf eines Malvern Panalytical-Produkts ist für uns erst der Beginn einer langjährigen Geschäftsbeziehung über die gesamte Lebensdauer des Gerätes, die Malvern Panalytical entsprechend Ihrem individuellen Bedarf gerne mit seinen Services unterstützt.
Für Labore bei denen die Geräte-Verfügbarkeit für die tägliche Arbeit kritisch ist. Der all-inclusive Vertrag sichert kürzeste Reaktionszeiten zu und deckt alle Wartungskosten, aber auch unerwarteten Reparaturkosten ab.
Stellen Sie die Produktivität Ihres Labors durch die regelmäßige Wartung Ihres Systems sicher und erhalten Sie einen schnellen, spezialisierten und kompetenten Support im Störungsfall.
Für Labore die eine einmalige vorbeugende Wartung oder Support-Leistung wünschen.
| Platin Vertrag | Gold Vertrag | Bronze Vertrag | |
|---|---|---|---|
| Jährliche Wartung und Verifizierung |
Ja
|
Ja
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Nein
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| Telefon / E-Mail Support |
Ja
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Ja
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Nein
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| Fixe Reaktionszeiten |
Ja
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Ja
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Nein
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| Notfall-Besuch im Störungsfall* |
Ja
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Ja
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Nein
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| Ersatzteile inklusive |
Ja
|
Nein
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Nein
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| Technik & Software Support |
Ja
|
Ja
|
Ja
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| IQ/OQ (Pharma)*** |
Ja
|
Ja
|
Ja
|
*inklusive Arbeits- und Anfahrtskosten***gegen geringen Aufpreis möglich
Direkte, markierungsfreie und in Lösung durchgeführte Messungen der Bindungsaffinität und der thermodynamischen Parameter in einem einzigen Experiment, um den vielfältigen und anspruchsvollen Anforderungen heutiger Life-Science-Labors gerecht zu werden.
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